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雜交瘤細(xì)胞株;23-1

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公司專注于細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞銷售的細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)研發(fā)的高科技企業(yè),主要擁有復(fù)蘇及凍存細(xì)胞及相關(guān)技術(shù)服務(wù),公司主要為細(xì)胞生命科學(xué)研究人員提供有效的、雜交瘤細(xì)胞株;23-1技術(shù)培訓(xùn)、售后服務(wù),其細(xì)胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細(xì)胞庫,以及部分國內(nèi)外細(xì)胞研究機(jī)構(gòu)建系。
細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞株;23-1
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
雜交瘤細(xì)胞株;23-1處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經(jīng)過滅菌處理的)培養(yǎng)瓶外部。
2、肉眼觀察培養(yǎng)基,若出現(xiàn)渾濁情況,請及時(shí)。
3、將細(xì)胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時(shí)。
4、嚴(yán)格無菌操作,拆下封口膜,如果細(xì)胞的量較少,可放置溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞量足夠,可進(jìn)行離心收集細(xì)胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養(yǎng)液后置于37℃,5%CO 2的培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞密度達(dá)到80%以上或存在成團(tuán)現(xiàn)象,建議用0.25%*消化后傳代培養(yǎng)。
5、如果細(xì)胞為凍存狀態(tài),可將其繼續(xù)放入液氮中繼續(xù)保存。也可將其放入37℃的水浴中不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細(xì)胞懸液,放入培養(yǎng)瓶中,再加入相應(yīng)的細(xì)胞培養(yǎng)液,放于37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)知識(shí):
1.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室 環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng) 基配制是減低污染之方法。
2.如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少, 大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性 損傷, 以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
4.購買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用 錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
〖級(jí)別〗:BR
分子量:18.4kDa,單體
來源:大腸桿菌MRE-600細(xì)胞
濃度:2~5u/ul 
活力定義:1個(gè)活性單位是指在37℃、20分鐘內(nèi)催化產(chǎn)生1nmol酸性可溶產(chǎn)物所需的酶量
酶活性分析混合物:20mM Tris-HCL(PH7.8), 40mM KC1, 8mM MgCL2, 1mM DTT, 24uM[3H]-poly(A)poly(dT), 0.03mg/ml BSA, 4%(v/v)甘油
〖保存〗緩沖液組成:25mM HEPES-KOH(PH8.0), 50mM KC1, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 0.1mg/ml BSA, 50%(v/v)甘油
10×反應(yīng)緩沖液:20mM Tris-HCL(PH7.8), 400mM KC1, 80mM MgCL2, 10mM DTT
質(zhì)量控制:相關(guān)測試表明無內(nèi)切或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:重組酶,是一種核糖核酸內(nèi)切酶,它能夠特異性地水解雜交到DNA鏈上的RNA磷酸二酯鍵,故能分解RNA/DNA雜交體系中的RNA鏈。該酶不能消化單鏈或雙鏈DNA。抑制劑有金屬螯合物、SH-封閉試劑
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:-20℃,如65℃加熱10分鐘會(huì)失活
核糖核酸酶T1
〖英文名稱〗:Ribonulease T1 from Aspergillus oryzae;Rnase T1
〖號(hào)〗:9026-12-4
〖級(jí)別〗:BR
分子量:11.2kDa,單體
來源:大腸桿菌細(xì)胞含有米曲霉(Aspergillus oryzae)來源的克隆基因rntA
濃度:1000U/ul
活力定義:1個(gè)活性單位是指37℃,pH7.5條件下,酵母RNA溶解水解15分鐘使其260nm波長吸光值增加1.0所需的酶量
酶活性分析混合物:50mM Tris-HCL(PH7.5), 2mM EDTA, 3mg/ml酵母RNA
〖保存〗緩沖液組分:50mM Tris-HCL(PH7.4)和50%(v/v)甘油
質(zhì)量控制:相關(guān)測試表明無內(nèi)切和外切脫氧核糖核酸酶、蛋酶污染,功能檢測方法為質(zhì)粒DNA純化過程雜交瘤細(xì)胞株;23-1中的RNA降解(與RNase A協(xié)同作用)
抑制劑:金屬離子Mg2+、Ca2+、Zn2+、Fe2+、Cu2+(MgCL2, 100mM濃度時(shí)抑制效率約40%;CaCL2,10mM濃度時(shí)抑制效率約30%;Zn2+、Fe2+和Cu2+在1mM時(shí)抑制效果很強(qiáng))、單核苷酸(2-GMP,3-GMP等)、guanilyl-2-5-鳥苷
失活:熱失活是可逆的,建議采用過柱純化或*/方抽提除去該酶
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:核糖核酸酶 T1是一種內(nèi)切酶,在G殘基位點(diǎn)特異性降解單鏈RNA。該酶通過形成核苷2′,3′-環(huán)磷酸中間體來切割3′-鳥苷殘基與鄰近核苷5′-OH基團(tuán)之間的磷酸二酯鍵。反應(yīng)產(chǎn)物是3′-GMP末端寡核苷酸。RNase T1發(fā)揮活性無需金屬離子參與

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