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小鼠單核巨噬細胞白血病細胞;RAW 264.7 RAW264.7
公司專注于細胞培養及細胞銷售的細胞生物學技術研發的高科技企業,主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務,公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、雜交瘤細胞株;2-189-H-1技術培訓、售后服務,其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫,以及部分國內外細胞研究機構建系。
細胞名稱 雜交瘤細胞株;2-189-H-1
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
雜交瘤細胞株;2-189-H-1處理方法
1、用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是經過滅菌處理的)培養瓶外部。
2、肉眼觀察培養基,若出現渾濁情況,請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察,如有污染,請及時。
4、嚴格無菌操作,拆下封口膜,如果細胞的量較少,可放置溫箱中繼續培養。如果細胞量足夠,可進行離心收集細胞,用1×PBS洗兩遍,加入新鮮培養液后置于37℃,5%CO 2的培養箱中繼續培養。若細胞密度達到80%以上或存在成團現象,建議用0.25%*消化后傳代培養。
5、如果細胞為凍存狀態,可將其繼續放入液氮中繼續保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動,盡快解凍。解凍后,用75%酒精將凍存管擦拭干凈,用吸管吸出細胞懸液,放入培養瓶中,再加入相應的細胞培養液,放于37℃培養箱中繼續培養。
細胞培養知識:
1.應如何避免細胞污染?
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉漿菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環境、與品質良好之細胞來源和培養 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發生微生物污染時,應如何處理?
雜交瘤細胞株;2-189-H-1直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經解凍后,為何會發生細胞數目太少之情形?
研究人員在冷凍細胞之培養時出現細胞數目太少, 大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性 損傷, 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?
研究人員在細胞培養時出現存活率不佳, 常見原因可歸納為:培養基使用錯誤或培養基品質不佳。血清使用 錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?
冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
;擴增片段長度多態性
〖保存〗: -20°C
末端轉移酶
〖英文名稱〗:TDT;Terminal Transferase;Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
〖其他名稱〗:末端脫氧核苷酸轉移酶;*
〖號〗:9027-67-2
分子量:60000
〖級別〗:BR
來源:大腸桿菌細胞,含有編碼牛胸腺末端脫氧核苷轉移酶的基因
濃度:20u/ul
活性定義:是指在37℃、60分鐘內將1nmol脫氧核糖核酸摻入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量
酶活性分析混合物:66mM二甲胂酸鉀(PH7.2),1mM CoCL2, 0.01%(v/v) Triton X-100, 10uM oligo(dT)10, 1mM dTTP和0.4MBq/ml[3h]-dTTP
〖保存〗液組分:100mM *(PH6.8)、2mM β-巰基乙醇,0.01%(v/v) Triton X-100和50%(v/v)甘油
5×反應緩沖液:1M 二甲胂酸鉀、125mM Tris,0.05%(v/v) Triton X-100,5mM CoCL2(PH7.2,25℃)
抑制劑:金屬螯合劑、銨、〖化物〗、碘化物和磷酸鹽離子
失活:加入EDTA,70℃加熱10分鐘
質量保證:測試表明無內切和外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染
注意:由于含有CoCL2,TdT反應緩沖液不能與下游應用兼容,需采用柱離心法或*/方抽提及乙醇沉淀方法純化反應混合物,除去CoCL2
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:懸浮液,重組酶。末端轉移酶(Terminal transferase, TdT)是一種無需模板的DNA聚合酶,催化脫氧核苷酸結合到DNA分子的3'羥基端。帶有突出、凹陷或平滑末端的單雙鏈DNA分子均可作為TdT的底物。一般操作是:先在載體上打開一單個位點,把它與末端轉移酶和某一dNTP(如dATP)一起保溫以使添尾,另一待插入的外源DN片段則用互補的用同法添dNTP(dTTP)用同法添尾。接著使上述兩種都接上互補單鏈尾的DN片段彼此退火,使形成一雜合載體雜交瘤細胞株;2-189-H-1來轉化受體菌。雜合載體中的裂隙或切口可被受全菌所修復。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)催化DNA的3'末端添加同聚物;DNA的3'末端標記
〖保存〗:-20°C
β-葡聚糖酶
〖英文名稱〗:β-Dextranase;1,6-α-D-Glucan 6-glucanohydrolase
〖其他名稱〗:葡聚糖酶;α-1,6-葡聚糖6-葡聚糖水解酶;右旋糖酐酶
〖號〗:9025-70-1
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