Cas9穩定表達的人結直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-565

公司專注于細胞培養及細胞銷售的細胞生物學技術研發的高科技企業，主要擁有復蘇及凍存細胞及相關技術服務，公司主要為細胞生命科學研究人員提供有效的、Cas9穩定表達的人結直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-565技術培訓、售后服務，其細胞主要來源ATCC、Riken、ScienCell、Invitrogen、ECACC、ACC等細胞庫，以及部分國內外細胞研究機構建系。

細胞名稱 Cas9穩定表達的人結直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-565
形態特性  上皮樣；多角
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞是采用慢病毒感染的方式使HCT116細胞穩定表達Cas9-Flag-Puromycin，經2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆，經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白，可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。 
培養條件  IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  10%FBS；2ug/ml Puromycin
傳代方法  1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：7,10；D12S391：17,20；D13S317：10,13；D16S539：11,14；D18S51：17,18；D19S433：12,12；D21S11：29,30；D2S1338：16,16；D3S1358：12,17；D5S818：10,11；D6S1043：14,14；D7S820：11,12；D8S1179：12,14；FGA：18,23；Penta E：13,14；TH01：8,9；TPOX：8,8；vWA：18,22；
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
Cas9穩定表達的人結直腸腺癌細胞；HCT116-Cas9-565處理方法
1、用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是經過滅菌處理的）培養瓶外部。
2、肉眼觀察培養基，若出現渾濁情況，請及時。
3、將細胞置于顯微鏡下觀察，如有污染，請及時。
4、嚴格無菌操作，拆下封口膜，如果細胞的量較少，可放置溫箱中繼續培養。如果細胞量足夠，可進行離心收集細胞，用1×PBS洗兩遍，加入新鮮培養液后置于37℃，5%CO 2的培養箱中繼續培養。若細胞密度達到80%以上或存在成團現象，建議用0.25%*消化后傳代培養。
5、如果細胞為凍存狀態，可將其繼續放入液氮中繼續保存。也可將其放入37℃的水浴中不時搖動，盡快解凍。解凍后，用75%酒精將凍存管擦拭干凈，用吸管吸出細胞懸液，放入培養瓶中，再加入相應的細胞培養液，放于37℃培養箱中繼續培養。
細胞培養知識：
1.應如何避免細胞污染？
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉漿菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室 環境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環境、與品質良好之細胞來源和培養 基配制是減低污染之方法。
2.如果細胞發生微生物污染時，應如何處理？
直接滅菌后丟棄之。
3.購買之細胞冷凍管經解凍后，為何會發生細胞數目太少之情形？
研究人員在冷凍細胞之培養時出現細胞數目太少， 大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性 損傷， 以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養基即可。
4.購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？
研究人員在細胞培養時出現存活率不佳， 常見原因可歸納為：培養基使用錯誤或培養基品質不佳。血清使用 錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養溫度使用錯誤。細胞置于-80℃太久。
5.收到之冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？
冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血 鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。緩激肽(BK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)白介素27w(IL27w)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Bradykinin (BK)48T/96T
纖維蛋白原β(FGβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)白介素27w(IL27w)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Fibrinogen Beta (FGb)48T/96T
松弛肽(RLN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GMCSF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Relaxin (RLN)48T/96T
TGFβ誘導早期應答基因1(TIEG1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GMCSF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Rattus norvegicus (Rat)ELISA Kit for TGF Beta Inducible Early Response Gene 1 (TIEG1)48T/96T
激素脫落酸(ABA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GMCSF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)GeneralELISA Kit for Abscisic Acid (ABA)48T/96T
胎盤堿性磷酸酶(ALPP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Placeal (ALPP)48T/96T
接觸蛋白關聯蛋白樣蛋白4(CNAP4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Coactin Associated Protein Like Protein 4 (CNAP4)48T/96T
糖抗原50(CA50)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Carbohydrate Aigen 50 (CA50)48T/96T
突觸核蛋白α(SNCα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Synuclein Alpha (SNCa)48T/96T
神經細胞黏附分子(NCAM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Neural Cell Adhesion Molecule (NCAM)48T/96T
抗補體1q抗體(Ai-C1q)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Ai-Compleme 1q Aibody (Ai-C1q)48T/96T
胃泌素(GT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Gastrin (GT)48T/96T
毒蕈堿型*受體M4(CHRM4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Muscarinic 4 (CHRM4)48T/96T
MAX基因關聯蛋白A(MgA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for MAX Gene Associated Protein (MgA)48T/96T
細胞毒性T-淋巴細胞關聯抗原4(CTLA4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cytotoxic T-Lymphocyte Associated Aigen 4 (CTLA4)48T/96T
角蛋白18(KRT18)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Keratin 18 (KRT18)48T/96T
細胞外基質磷酸糖蛋白(MEPE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Matrix Extracellular Phosphoglycoprotein (MEPE)48T/96T
周期素依賴性激酶4(CDK4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)粒細胞集落刺激因子(GCSF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cyclin Depende Kinase 4 (CDK4)48T/96T
殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)粒細胞集落刺激因子(GCSF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Bactericidal/Permeability Increasing Protein (BPI)48T/96T
毒蕈堿型*受體M5(CHRM5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)粒細胞集落刺激因子(GCSF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Muscarinic 5 (CHRM5)48T/96T
纖溶酶原(Plg)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)膠質細胞系來源神經營養因子(GDNF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit for Plasminogen (Plg)48T/96T
纖維蛋白肽A(FPA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)膠質細胞系來源神經營養因子(GDNF)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)Homo sapiens (Human)ELISA Kit