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上海莼試生物技術有限公司
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ATCC細胞胞內染色及注意事項

時間:2018/2/24閱讀:148
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將全部ATCC細胞固定打孔。每管加入 150 μL 固定破膜劑,震蕩混勻,4℃ 避光孵育 20 min。

ICS Wash Buffer 液洗滌,用法同 Wash Buffer 液。

在相應的需要進行胞內染色的樣本中加入適當量胞內染色抗體(如 APC IFN-γ抗體),4℃ 孵育 30 min 或室溫避光孵育 15 min。ICS Wash Buffe 液洗滌,1 500 rpm 離心 5 min。

棄離心上清液,根據實際情況加入 200 μL 或者 300 μL Wash Buffer 液重懸。

震蕩混勻,流式上機。

 注意事項

每一步離心倒掉上清時可以先在實驗臺上鋪幾層平板紙,傾倒上清后可吸掉管口的液體。

為了避免打孔劑對細胞形態的影響從而影響后續圈門影響實驗結果,所以不管是否需要胞內染色,每個樣本都需要打孔。

染色時抗體的加入量可根據實際情況調整,為避免抗體濃度對染色的影響,樣品染色體系不得大于 100 μL。為減少染色時加樣的誤差,可配置表面染色抗體稀釋液,雙染或多色染色可把多種抗體稀釋到一管中。按 10 μL 或5 μL 體系,用 Wash Buffer 液稀釋。

為了避免游離抗體的結合出現假陽性,可洗滌兩次。

檢測的ATCC細胞量不能過少也不能過多,細胞太少檢測時樣本流量會增大影響變異系數,細胞過多,可能會導致抗體或染料相對不足,影響實驗結果。
187393-00-6    Bemotrizinol    雙-乙基乙氧*甲氧苯基三嗪標準品    200mg
73-48-3    Bendroflumethiazide    芐氟噻嗪標準品    200mg
5987-82-6    Benoxinate Hydrochloride    *標準品    200mg
132-17-2    Benztropine Mesylate    甲磺酰苯扎托品標準品    200mg
5579-84-0    Betahistine Hydrochloride    *標準品    200mg
590-46-5    Betaine Hydrochloride    鹽酸甜菜堿標準品    200mg
378-44-9    Betamethasone    *標準品    200mg
22298-29-9    Betamethasone Benzoate    苯甲酸*標準品    200mg
2152-44-5    Betamethasone Valerate    戊酸*標準品    200mg
63659-19-8    Betaxolol Hydrochloride    *標準品    200mg
ATCC細胞

 

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