細(xì)胞密度
● 人源細(xì)胞：貼壁培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)入對數(shù)生長期、未達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí)即應(yīng)進(jìn)行傳代。正常細(xì)胞達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí)會停止生長（接觸抑制），重新接種后需要較長時(shí)間才能恢復(fù)。轉(zhuǎn)化細(xì)胞即使達(dá)到匯合狀態(tài)也能繼續(xù)增殖，但是在經(jīng)過大約兩個(gè)倍增時(shí)間后通常會變質(zhì)。類似地，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)入對數(shù)生長期、未達(dá)到會和狀態(tài)時(shí)也應(yīng)進(jìn)行傳代。達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí)，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞會聚集成團(tuán)塊，轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶時(shí)培養(yǎng)基會變得渾濁。
● 昆蟲細(xì)胞：昆蟲細(xì)胞進(jìn)入對數(shù)生長期、未達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí)應(yīng)進(jìn)行傳代。牢固貼壁的昆蟲細(xì)胞達(dá)到匯合狀態(tài)時(shí)也可傳代，雖然此時(shí)細(xì)胞更容易從培養(yǎng)器上解離下來，但是如果反復(fù)將昆蟲細(xì)胞在密度超過匯合的狀態(tài)下傳代，細(xì)胞的倍增次數(shù)會減少，活力會降低，貼壁能力也會下降。另一方面，將貼壁培養(yǎng)的昆蟲細(xì)胞在達(dá)到匯合狀態(tài)前傳代需要較大的機(jī)械力，才能使細(xì)胞從單細(xì)胞層中脫離。反復(fù)在達(dá)到匯合狀態(tài)前傳代，會導(dǎo)致細(xì)胞倍增次數(shù)減少，活力降低，健康度較差。

培養(yǎng)基耗竭
● 哺乳動物細(xì)胞：生長培養(yǎng)基pH值降低，通常表示乳酸蓄積，乳酸是細(xì)胞代謝的副產(chǎn)物。乳酸有細(xì)胞毒性，而且pH值減低也是細(xì)胞生長的不利因素。pH值改變的速度通常取決于培養(yǎng)體系中的細(xì)胞濃度，細(xì)胞濃度越高，培養(yǎng)基耗竭的速度越快。如果發(fā)現(xiàn)pH值迅速降低（>0.1-0.2 pH單位），同時(shí)細(xì)胞濃度增大，則應(yīng)對細(xì)胞進(jìn)行傳代。
● 昆蟲細(xì)胞：用于昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)的生長培養(yǎng)基通常比哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)基酸度大。例如，用于Sf9細(xì)胞培養(yǎng)的TNM-FA和Grace 培養(yǎng)基的pH 值為6.2。與哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)過程不同，昆蟲細(xì)胞生長時(shí)培養(yǎng)基的pH值會逐漸升高，但一般不會超過6.4。但是，與哺乳動物細(xì)胞一樣，昆蟲細(xì)胞達(dá)到較高密度后生長培養(yǎng)基的pH值也會開始降低。

傳代時(shí)間安排
嚴(yán)格按照預(yù)定時(shí)間進(jìn)行細(xì)胞傳代可確保細(xì)胞的生物學(xué)行為穩(wěn)定，便于監(jiān)測其健康狀態(tài)。從某一接種密度開始逐漸調(diào)整細(xì)胞接種密度，直到達(dá)到適合該細(xì)胞的穩(wěn)定生長速度和產(chǎn)量。人源細(xì)胞偏離如此確定的生長模式通常表示細(xì)胞健康狀況不佳（例如：變質(zhì)、污染）或者培養(yǎng)體系的某一組分功能異常（例如：未達(dá)到zuih 溫度、培養(yǎng)基過于陳舊）。我們強(qiáng)烈建議您保留詳細(xì)的細(xì)胞培養(yǎng)記錄，記錄加料和傳代時(shí)間、所用培養(yǎng)基種類、解離方法、分種率、形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果、接種濃度、產(chǎn)量和抗生素用法。

按照傳代時(shí)間安排開展實(shí)驗(yàn)和其他非常規(guī)操作（如更換培養(yǎng)基種類）。如果您的實(shí)驗(yàn)安排與常規(guī)傳代時(shí)間安排不吻合，則應(yīng)確保當(dāng)細(xì)胞仍處于延滯期或者已經(jīng)達(dá)到匯合狀態(tài)，停止生長時(shí)，不進(jìn)行傳代。
anti-IAP-5      規(guī)格:    規(guī)格：     0.2ml    產(chǎn)品名稱:    凋亡抑制因子5抗體
Anti-IASPP      規(guī)格:    規(guī)格：     0.1ml    產(chǎn)品名稱:    腫瘤細(xì)胞凋亡ASPP家族的另一個(gè)成員抗體
Anti-ICAD  Caspase     規(guī)格:    規(guī)格：     0.2ml    產(chǎn)品名稱:    激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑
Anti-IDE      規(guī)格:    規(guī)格：     0.1ml    產(chǎn)品名稱:    胰島素降解酶抗體
Mouse Anti-influenza A virus nucleoprotein Monoclonal      規(guī)格:    規(guī)格：     0.1ml    產(chǎn)品名稱:     鼠抗人禽流感A核蛋白單克隆抗體
人源細(xì)胞