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單個ATCC細(xì)胞的生長過程即為細(xì)胞周期,所謂細(xì)胞周期是為研究細(xì)胞的生長行為而提出的。在動物體內(nèi)或體外培養(yǎng)中,細(xì)胞處于生長或靜止?fàn)顟B(tài)。細(xì)胞生長包括DNA合成及細(xì)胞分裂兩個關(guān)鍵過程。細(xì)胞周期即一個母細(xì)胞分裂結(jié)束后形成的細(xì)胞至其下一次再分裂結(jié)束形成兩個子細(xì)胞的這段時期,可分為間期和M期(分裂期)兩個階段。細(xì)胞群中多數(shù)細(xì)胞處于間期,少數(shù)細(xì)胞處于M期。一般間期的時間較長,而M期的時間較短。在間期,細(xì)胞完成生長過程,主要為DNA的合成,即遺傳物質(zhì)DNA的復(fù)制。在M期,細(xì)胞所完成的主要是分裂,即遺傳物質(zhì)的分配。在間期中,DNA合成僅占其中的一段時間,稱為DNA合成期(S期);在s期之前和s期之后,分別有兩個間隙階段,稱為DNA合成前期(G1)及DNA合成后期(G2)。因此,可將細(xì)胞周期歸納如下:
①G1期。DNA合成前期,又稱細(xì)胞分裂后期。發(fā)生于一個細(xì)胞周期中M期完成之后。此期長短因細(xì)胞而異,體內(nèi)大部分細(xì)胞在完成上一次分裂后分化并執(zhí)行各自功能,此G-期的早期階段特稱G0期。在G1期中主要為過渡至s期作物質(zhì)的準(zhǔn)備,即為下一步DNA復(fù)制和蛋白質(zhì)合成準(zhǔn)備,包括初階段時RNA的合成、cGMP及cAMP的形成,以及后階段時DNA前驅(qū)物質(zhì)脫氧核苷酸、胸苷激酶等。此外,為了以后中心體的復(fù)制作準(zhǔn)備,在本期末,中心體將進(jìn)行分離。各種細(xì)胞G.期持續(xù)時間的長短差異較大,短者4~5 h,長者可達(dá)數(shù)日。增殖旺盛細(xì)胞的G1期持續(xù)時間短,衰退細(xì)胞則時間長。
②s期。s期即DNA合成期。本期的機(jī)能活動主要為DNA的合成、復(fù)制。若DNA的復(fù)制發(fā)生錯誤,將引起變異而導(dǎo)致產(chǎn)生異常細(xì)胞。在s期的開始階段,DNA合成的強(qiáng)度較大,以后逐漸減少,至s期結(jié)束時DNA含量將加倍。本期為遺傳物質(zhì)較易受損的時期,因?yàn)镈NA在合成過程中,其核苷酸雙鏈分離,易于受到致突變或致癌物的影響。各種細(xì)胞的s期持續(xù)時間差別較小,在2—30 h,平均6~8 h。
③G2期。G2期為DNA合成后期,又稱細(xì)胞分裂前期。本期細(xì)胞的DNA含量已加倍,正進(jìn)行細(xì)胞分裂的準(zhǔn)備工作。主要的變化是RNA及蛋白質(zhì)的合成、染色質(zhì)的螺旋化等。在G2期,蛋白質(zhì)的合成與細(xì)胞的分裂有關(guān),若此期內(nèi)蛋白質(zhì)的合成受阻,將影響細(xì)胞的分裂。細(xì)胞處于本期時對周圍環(huán)境較敏感,易因溫度、pH等因素的影響而受干擾,停滯于G2期,但當(dāng)不利的作用因素去除后常能恢復(fù)。本期持續(xù)時間較短,為2~3 h或略長。
④M期。M期為有絲分裂期,是細(xì)胞周期的終結(jié)期,此時每個細(xì)胞將分裂成2個子細(xì)胞。細(xì)胞處于分裂時稱為分裂相。細(xì)胞分裂相的多少可作為細(xì)胞生活狀態(tài)和增殖旺盛情況的重要參考指標(biāo)。M期整個持續(xù)時間很短,也較穩(wěn)定,一般只有l(wèi)一2 h。細(xì)胞分裂的進(jìn)程叉分為前、中、后、末4期。
a.有絲分裂的前期:至今未明確細(xì)胞如何從G:期結(jié)束后過渡到本期的確切標(biāo)記。前期zui開始可能是出現(xiàn)細(xì)胞核的轉(zhuǎn)動。當(dāng)核內(nèi)可見染色質(zhì)且逐漸清楚時,表示細(xì)胞已進(jìn)入有絲分裂前期。染色質(zhì)進(jìn)一步濃縮,形成有一定數(shù)目及形狀的染色體。以后,核膜和核仁消失,染色體混入至胞質(zhì)之中且呈活躍的運(yùn)動。細(xì)胞胞質(zhì)逐漸回縮,細(xì)胞傾向于形成球狀。已復(fù)制的兩個中心體開始分離并向兩極移動,兩中心體之間有絲相連而形成紡錘體。紡錘體并不穩(wěn)定而以伸縮或擺動等狀態(tài)移動。染色體漸由分散狀態(tài)向細(xì)胞*移動集中,并很快排列于赤道平面,此時前期結(jié)束。前期持續(xù)時問20—30 min。
b有絲分裂的中期:中期ATCC細(xì)胞的染色體高度濃縮,形成典型的中期染色體,集中于赤道平面,喪失其明顯的運(yùn)動。此種聚集在赤道平面上的中期染色體又稱為中期板,具有一定的方向性,常與底物的平面垂直。兩個中心體亦已*移至兩極,紡錘體則基本停止移動。此期細(xì)胞的胞質(zhì)進(jìn)一步發(fā)生回縮,細(xì)胞呈球形。由于它們呈球狀而與底物附著面縮小,易于因搖動、沖擊等作用而自底物脫落,常可作為中期分裂相細(xì)胞收集的方法。這是有絲分裂細(xì)胞選擇性同步化方法的一種。細(xì)胞在本期時對外界因素敏感,易于受影響而延緩甚至停止向后期過渡。中期持續(xù)時間為20一30 min。
c.有絲分裂的后期:后期開始的標(biāo)志為染色體的一分為二。中期板的各個染色體于著絲點(diǎn)開始分離而成為兩個染色單體。分開的染色體(染色單體)分為兩組并分別向兩極移動。整個細(xì)胞也隨著向兩極拉長,漸漸由圓球形變成橢圓的球形,在赤道部開始變窄,胞體似啞鈴狀。后期持續(xù)時間zui短,僅5—6 min。
d.有絲分裂的末期:在本期,胞質(zhì)中分別移動的兩組染色體到達(dá)兩極,細(xì)胞繼續(xù)拉長,染色體重新變成染色質(zhì),核仁和核膜再次出現(xiàn),胞體中部進(jìn)一步變細(xì),胞體逐漸分離而形成兩個子細(xì)胞。開始時,這兩個子細(xì)胞之間仍有細(xì)絲相連,較長時間后*分開成為兩個獨(dú)立的子細(xì)胞。以后各子細(xì)胞胞質(zhì)重新伸展,細(xì)胞恢復(fù)原來的形態(tài)。于是細(xì)胞又開始進(jìn)入G1期。本期持續(xù)的時間為20一30 min。
整個細(xì)胞周期和細(xì)胞周期中各時期的持續(xù)時間因不同細(xì)胞類型而異。一般說來,哺乳動物細(xì)胞的細(xì)胞周期為1O~30 h。其中s期、G2期及M期一共為10 h左右,不同細(xì)胞的變異程度較小;而G1期持續(xù)的時間差別則較明顯。因此,某種ATCC細(xì)胞的細(xì)胞周期時間的長短主要與G1期的關(guān)系密切。
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