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進行ELISA試劑盒各項實驗條件包括哪些選擇

閱讀:159發布時間:2018-3-12

1、ELISA試劑盒固相載體的選擇:不管何種載體,在使用前均可進行篩選,用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
2、包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間,吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時,
3、酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份),然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
4、ELISA試劑盒酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。


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