1．破壞
ELISA試劑盒一般用磨粉機(jī)、糧谷破壞機(jī)、絞肉機(jī)等將塊狀的或顆粒較大的動植物樣本細(xì)化的進(jìn)程。意圖是增大樣本表面積，有利于待測組分的提取。
2．提取
提取是使待測組分與樣品別離的進(jìn)程。
ELISA試劑盒提取的辦法較多，有靜置法、勻漿法、振動提取法、設(shè)備提取法等。現(xiàn)將常用的提取辦法扼要介紹如下：
(1) 安排搗碎法是食物檢測中zui常用的一種提取辦法，將經(jīng)破壞的樣品與等量或數(shù)倍于其體積的溶劑混合，經(jīng)過高速旋轉(zhuǎn)的葉片(100r／min)將樣本中的待測組分與溶劑有充沛的觸摸機(jī)會，使待測組分被提取出來。該辦法提取功率高。使用的首要設(shè)備有高速安排搗碎機(jī)、安排勻漿機(jī)、高速均質(zhì)器等。在農(nóng)藥殘留量剖析中簡直都選用安排搗碎法提取，每次提取的時刻約為3～5min，次數(shù)1～2次。在本操作進(jìn)程中，需求留意以下事項：試樣和溶劑的總體積不應(yīng)該超過搗碎缽容積的2／3，避免內(nèi)容物濺起；搗碎機(jī)的旋轉(zhuǎn)速度，一般是先慢后快；整個操作要在通風(fēng)杰出的環(huán)境下進(jìn)行。
(2) 索氏提取法也是食物檢測中zui常用的提取辦法之一。此法經(jīng)過設(shè)備——索氏提取器提取待測組分，提取功率高，操作簡潔，但提取時刻長。選用索氏提取法時，應(yīng)充沛考慮待測組分的熱穩(wěn)定性。
(3) 振動法在食物檢測中也較為常用。行將裝有試樣和提取溶劑的具塞容器，放在振動機(jī)上，進(jìn)行往復(fù)振動或旋轉(zhuǎn)振動，使容器內(nèi)的提取溶劑與試樣充沛觸摸，以深化到樣本安排內(nèi)部提取待測組分。一般情況下，振動10-30min，重復(fù)提取2～3次。據(jù)報道，振動法與安排搗碎法和索氏提取法的提取功率適當(dāng)。日本的食物剖析辦法中簡直都選用振動法。
(4) 超臨界流體萃取儀、強(qiáng)化溶劑萃取儀是近二十年來發(fā)展起來的提取技能。別的還有一些輔佐手段，如超聲波輔佐提取、微波輔佐提取等。
3．凈化
經(jīng)過提取的待測組分，提取物中一般含有與該組分結(jié)構(gòu)類似的雜質(zhì)，將待測組分與雜質(zhì)別離的進(jìn)程，稱為凈化。
該進(jìn)程是樣本前處理的技能難點(diǎn)，也是關(guān)系到檢測成果的真實(shí)性及檢測辦法可靠性的重要進(jìn)程。首要辦法有固相萃取法、液-液分配法、化學(xué)處理法、掃集共蒸餾法、低溫冷凍凈化法、前置色譜柱凈化法等。
固相萃取法是現(xiàn)在應(yīng)用zui多的凈化辦法之一，經(jīng)過吸附柱、分配柱、凝膠浸透柱、薄層板等完成，其原理是樣本的待測組分在層析柱中吸附劑上被吸附與被解吸的反復(fù)進(jìn)程。常用的吸附劑有佛羅里硅土、氧化鋁、活性炭、硅膠、氧化鎂和纖維素等。
液-液分配法也是一種非常常用的凈化辦法，其原理是使用待測組分在一組互不相溶的溶劑對內(nèi)的分配系數(shù)不同，經(jīng)過反復(fù)多次分配，使待測組分與雜質(zhì)別離，以到達(dá)凈化意圖。常用的溶劑對有乙腈提取液的正已烷分配、乙腈提取液的分配、丙酮提取液的石油醚分配、丙酮提取液的二氯甲烷分配等。
4．濃縮
ELISA試劑盒因為凈化進(jìn)程所引進(jìn)的溶劑，可能會下降待測組分的濃度或不適宜直接進(jìn)樣，需求去除部分或全部溶劑及進(jìn)行溶劑變換，此進(jìn)程為濃縮或富集。首要經(jīng)過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器蒸干或惰性氣體(如氮?dú)?吹干除掉溶劑。
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