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ELISA試劑盒直接法和間接法優(yōu)缺點

閱讀:732發(fā)布時間:2017-6-21

ELISA試劑盒可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定辦法中有三個必要的試劑:
(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);
(2)酶符號的抗原或抗體,稱為"物"(conjugate);
(3)酶反響的底物。依據試劑的來歷和標本的狀況以及檢查的具體條件,可設計出各種不類型的檢查辦法。
ELISA試劑盒可依據抗原抗體的狀況來分類為以下兩種辦法。
直接法(direct ELISA)
將抗原直接固定在固相載體上,加入酶符號的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。
優(yōu)勢:操作手續(xù)簡短,因無須運用二抗可防止交互反響。
缺陷:實驗中的一抗都得用酶符號,但不是每種抗體都適合做符號,費用相對進步。
間接法(indirect ELISA)
ELISA試劑盒此測定辦法與直接法相似,不一樣在于一級抗體沒有酶符號,改用酶符號的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
優(yōu)勢:二抗可以加強信號,而且有多種選擇能做不一樣的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保留它zui多的免疫反響性。
缺陷:交互反響發(fā)作的機率較高。

 


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