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適用領域	科研

豬TGFβ1試劑盒說明書【實驗用途】E-Selectin, E選擇素，選擇素家族一員，是一種分子量107-115KDa的細胞表面糖蛋白。E選擇素配體在中性粒細胞、單核細胞、部分記憶T細胞上表達。E選擇素/E選擇素配體在炎癥時使中性粒細胞吸附至血管壁，并沿血管壁移動。此初始反應引起ICAM-1，VCAM-1更強烈的反應，Z終使炎癥細胞進入血管外間質。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經生物素（biotin）標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應；經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。
試劑配制：
1、豬TGFβ1試劑盒說明書酶聯板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
豬TGFβ1試劑盒說明書Rat E-Selectin/E-Sel ELISA Kit

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選擇ELISA試劑盒應從靈敏度、特異性、精密度、穩定性、簡便性、安全性及經濟性全面評價。
一.靈敏度：有二層含義：
1）為試劑檢出被檢物質的Z低量的能力；
2）為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。
1.精密度：ELISA試劑一般指其批內CV%，其值應小于15%；定量試劑應同時考察線性范圍。
2.準確度：通過添加回收實驗進行評價。
3.簡便性：指在不影響試劑的前三項指標的前題下，實驗和測定步驟越少越好，在定性實驗中結果判斷簡單明了，定量試驗結果計算也應簡單。
4.安全性：指試劑對操作者和環境安全無害無傳染性。
5.經濟性：試劑在同等質量條件下通過大規模或技術進步降低成本，而市場價格比較合理。
6.試劑評價：需要有的確證方法和確證的樣品進行檢測。
結果判斷與分析：
1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的待測物質標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的待測物質含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
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