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上海研生實業(yè)有限公司
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當前位置:上海研生實業(yè)有限公司>>PCR類>>DNA提取試劑盒>> 100mL組織保存液

組織保存液

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號100mL

品       牌其他品牌

廠商性質經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-11-19 15:37:15瀏覽次數(shù):148次

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規(guī)格 100mL 貨號 YS-P013251
品牌 YSRIBIO
組織保存液原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

服務流程:

公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

組織保存液

100mL

YS-P013251

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
QQ截圖20191211135002.jpg

PCR反應的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

人硫酸軟骨素(CS)  吲哚美辛促腎上腺皮質激素(1-39)抗體

人絨毛膜促性腺激素β(CGβ) 吲哚美辛(標準品)促腎上腺皮質激素ACTH(18-39)抗體

人碳酸酐酶XII(CA12)西米替汀促腎上腺皮質激素ACTH (7-23)抗體

人染色盒同源物3(CBX3)西米替汀(標準品)活性依賴的神經(jīng)保護肽抗體

人染色質區(qū)解旋酶DNA結合蛋白3(CHD3)阿德福韋/阿德福韋酯α1酸性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體

人染色質區(qū)解旋酶DNA結合蛋白5(CHD5)阿德福韋/阿德福韋酯(標準品)α1酸性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2)

人嗜鉻蛋白A/胰抑制素(CgA/Pancreastatin)  R-鹽酸普拉克索磷酸化水通道蛋白2抗體

人神經(jīng)絲蛋白3(NEF3)氯酪氨酸轉氨酶抗體

人輕肽神經(jīng)絲蛋白(NEFL(標準品)抗利尿激素/血管升壓素/加壓素/血管加壓素抗體

人神經(jīng)型一氧化氮合酶(NOS1/nNOS)恩諾沙星ATP結合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體

V-Jun瘤病癌基因同源物(C-jun)恩諾沙星(標準品)糖還原酶抗體

人克拉拉蛋白(CC16)  鹽酸恩諾沙星人血清白蛋白抗體

人封閉蛋白1(CLDN1) 鹽酸恩諾沙星(標準品)抗體(采用活疫苗制備)

人封閉蛋白14(CLDN14) 佐米曲普坦活化轉錄因子4抗體

人白分化抗原CD109(CD109) 胸腺肽alpha 1腺苷酸激酶-1抗體

人白分化抗原CD30(CD30) 替加氟纖維狀肌動蛋白抗體
組織保存液BAFFR/CD268  B活化因子受體抗體異丁香酚(正+反) 分析標準品,用于環(huán)境分析

bFGF/FGF-2  堿性成纖維生長因子抗體異戊 99%

BGP  骨保護蛋白/骨鈣素抗體無水三氯化鐵 ≥99.99% metals basis

Bid  BH3結構域凋亡誘導蛋白抗體三氟磺酸銦 98%

BIN1  橋連整合因子蛋白抗體2-亞氨基生物素 98%

Bim  死亡調解子抗體肌苷-5′-磷酸二鈉鹽 99%

phospho-Bim(Ser87)  磷酸化死亡調解子抗體5--2- 98%

phospho-Bim(Ser55)  磷酸化死亡調解子抗體胰島素 ≥27 USP units/mg (HPLC)
反應五要素:

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

 


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