公司向您推薦Primarker™大鼠結腸平滑肌細胞鑒定試劑盒的詳細說明：

細胞株的培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)：
用于檢測細胞因子的細胞株通常培養(yǎng)于含10％小牛血清和抗生素的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)對細胞因子有依賴性的細胞株時還有加入適量細胞因子。在37℃ 5％ CO2 的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，根據(jù)細胞生長特性，在適當?shù)臅r候進行傳代，一般3～4 天傳代一次。
懸浮生長細胞的傳代：
直接離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液稀釋懸浮細胞，一般按1：2-1：5 稀釋細胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
?
實驗操作步驟：
a．采用認可的方案處死人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞嚙齒動物。   
b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。 
c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。   
d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。   
e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。
實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；

DNA探針同位素（[α32P]dCTP）聚合酶整合標記試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

組織堿性酶活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

組蛋白轉甲基酶活性檢測試劑盒（H3-K9） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

大量全血基因組DNA純化試劑盒（20毫升全血） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10次

組織絡氨酸酶（TP）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

基因甲基化程度定量分析試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

細菌樣品二維電泳裂解 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：用于細菌蛋白二維電泳

體科薩基病毒A（Coxsackievirus A）定性檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

小鼠c－fos基因甲基化檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

組織MSK1激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

組織ZAP70激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

化妝品甘素（dulcin）含量高效相色譜法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

Primarker™大鼠結腸平滑肌細胞鑒定試劑盒MDA-MB-468(人腺細胞)5×106cells/瓶×2

水解酪蛋白胨（MH）瓊脂 規(guī)格： 250g 用途： 滅菌后冷卻至45℃左右時加入5%的脫纖維羊血，配成Mueller Hinton 血平板，用于空腸彎菌的藥敏試...

改良麥康凱肉湯基礎 (CT-SMC) 規(guī)格： 250g 用途： 用于大腸埃希氏菌0157:H7/NM的選擇性增菌培養(yǎng)(4789.36-2008)。

硝酸蛋白胨水培養(yǎng)基 規(guī)格： 250g 用途： 用于鑒別綠膿桿菌分解硝酸產(chǎn)氣試驗

改良V-P培養(yǎng)基/V-P Medium Modified蠟樣芽孢桿菌的溶血試驗250克國產(chǎn)/進口

化高鐵血紅蛋白參比(4種×2套) /Cyanomethemoglobin reference solution10毫升×8支國產(chǎn)/進口

葡枝霉 Rhizopus stoloniferOS-RC-2(人腎細胞)

葡萄糖半固體培養(yǎng)基/葡萄糖半固體發(fā)酵管/Dextrose Semisolid Medium用于志賀氏菌的生試驗250克國產(chǎn)/進口

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus小檗堿

MX-1(人腺細胞)5×106cells/瓶×2

半固體瓊脂發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。