雌二醇（E2）含量ELISA測試盒測定步驟：

1.加樣

1.除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結(jié)果，準確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

實驗結(jié)果判斷我有妙招：

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求：

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣，水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封，并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑，應(yīng)將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存，其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng)，所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風處保存。

phospho-Androgen Receptor (Ser650)磷酸化雄激素受體抗體

phospho-AKT1+2+3 (Tyr315+316+312) 磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體

phospho-AKT1(Thr34)磷酸化蛋白激酶B抗體

phospho-ATF2(Ser472)磷酸化活化復制因子2抗體

3-Apr凋亡相關(guān)蛋白3抗體

ATG18自噬相關(guān)蛋白18抗體

ATG4A自噬相關(guān)蛋白4A抗體

APOA4載脂蛋白A4抗體

ALOX1212脂氧合酶抗體

Angiotensin III血管緊張素III抗體

ADCY3腺苷酸環(huán)化酶3抗體

Angiomotin血管動蛋白抗體

Adenovirus 5 E1A腺病毒早期E1A蛋白抗體

phospho-ATF2 (Ser44)磷酸化活化復制因子2抗體

phospho-ATF2 (Ser94)磷酸化活化復制因子2抗體

phospho-ATXN1(Thr236)磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體

ANKRD17錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體

ALDH1A1胞質(zhì)乙醛脫氫酶1抗體

ARL3ADP核糖基化樣因子ARL3抗體

15 Lipoxygenase 1花生四烯酸15脂氧合酶1抗體

ABC2乳腺癌增強蛋白2抗體

Alpha 1 microglobulinα1微球蛋白抗體

Alpha B Crystallinα晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體

ADORA2B腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體

ARK5AMPK的相關(guān)蛋白激酶5抗體