一、 細(xì)胞株使用PBS 磷酸緩沖鹽溶液（一般作為溶劑，起溶解保護(hù)試劑的作用）

PBS 1L配方pH7.4：磷酸二氫鉀(KH2PO4)：0.27g，

磷酸氫二鈉(Na2HPO4)：1.42g，

加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙?，然后加入濃鹽酸調(diào)pH至7.4，

Z后定容到1L

高溫高壓滅菌后置于4攝氏度冰箱保存待用。

（一般情況下，現(xiàn)配現(xiàn)用，易變質(zhì)暴露在空氣中）

二、 細(xì)胞消化液

0.25%胰酶-0.02%EDTA的配制

配方：100ml PBS,0.25g胰酶

步驟：

1、先配100mlPBS

2、稱胰酶0.25g

3、加入PBS中，低速攪拌 <4h冰浴中,或者4℃過夜低速攪拌0.5h冰浴中(儲(chǔ)存-20攝氏度冰箱中，使用保存4攝氏度)

4、調(diào)PH7.4

5、仍在冰浴中

6過濾，分裝，-20℃保存，4℃短期內(nèi)用完

Tip:低速很重要，機(jī)械攪拌對(duì)酶是一種沖擊，如果起沫，酶就變性了。低溫，防止酶失活

對(duì)難消化的細(xì)胞：在上述配方中，加入0.02g的EDTA(0.02%)

Tip:因?yàn)镋DTA可以絡(luò)合Ca2 ，增加消化效力

三、細(xì)胞株培養(yǎng)基

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC細(xì)胞

培養(yǎng)基RPMI 1640 培養(yǎng)基/DMEM培養(yǎng)基

肝癌細(xì)胞HepG-2細(xì)胞培養(yǎng)基

DMEM培養(yǎng)液(含100 U/ml-青霉素、100 U/ml鏈霉素、10%新生牛血清
EMSA探針－YY1(10μM)    30μl
生物素標(biāo)記EMSA探針－YY1(0.2μM)    200μl
EMSA突變探針－YY1(1.75μM)    60μl
EMSA突變探針－YY1(10μM)    30μl
EMSA探針－按需制備(1.75μM)    60μl
EMSA探針－按需制備(10μM)    30μl
生物素標(biāo)記EMSA探針－按需制備(0.2μM)    200μl
細(xì)胞株