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保存條件 | 2-8℃、避光 | 貨號 | GOY-XP5171 |
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產品規格 | 500ml | 用途 | 僅供科研實驗 |
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
產品名稱 | 內皮細胞專用培養基 | 貨號 | GOY-XP5171 |
規格 | 500ml | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
詳情描述
原代內皮細胞培養體系是一個為體外生長的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳動物的大血管和微血管內皮細胞設計的理想的wan全培養基方案。本體系是一個基于碳酸氫鹽的緩沖體系,可以在孵育的5%的CO2的氣體環境下維持一個圍繞pH7.2的酸堿緩沖體系。本體系是一個無菌的液體混合系統,其中包含必須和非必須氨基酸、維生su、激su、生長因子、微量元su和一些其他的有機和無機化合物以及一個低濃度的胎牛血清(5%)。本培養體系是基于固定配方配制的液態培養體系,可以為體外培養的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳動物的血管內皮細胞提供一個確定適宜的平衡營養環境,并且可以選擇性的促進血管內皮細胞的擴增。
放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸(儲存條件2-8℃ 避光儲存)產品保質期12個月。
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細胞復蘇?:
從液氮罐中取出凍存細胞,迅速放入37℃水浴中解凍。
解凍后,將細胞轉移到含有新鮮培養基的培養皿中,輕輕搖動使細胞均勻分布。
放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。
?細胞換液?:
吸除或倒掉培養皿內的舊培養液。
加入PBS緩沖液,輕輕漂洗細胞,以去除懸浮在細胞表面的碎片,重復幾次。
加入新的培養基。
?細胞傳代?:
當細胞長到80%~90%時,進行傳代。
吸除或倒掉瓶內舊培養液,加入PBS緩沖液漂洗。
加入消化液,輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。
將培養瓶放入37℃培養箱中靜止幾分鐘,觀察細胞變化。當細胞間隙增大后,加入含有血清的培養液終止消化。
吹打細胞使其成為懸液,轉移到離心管中離心。
棄上清,加入適量的細胞培養液重懸細胞。
按比例分裝到新的培養皿中,補加新鮮培養基。
做好標記,放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。
?細胞凍存?:
選擇對數生長期的細胞進行凍存。
將細胞轉移到離心管中離心,棄上清。
加入適量的凍存液(如90%的培養基+10%的DMSO),輕輕吹打重懸細胞。
將細胞轉移到冷凍保存管中,標記后放入程序降溫盒,再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。
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