細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    犬腎細(xì)胞：MDCK(NBL-2)

別稱MDCK (NBL-2); NBL-2; Madin-Darby Canine Kidney; Madin Darby Canine Kidney

種屬家犬

年齡（性別）雌性，成年

組織來(lái)源腎

生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述MDCK(NBL-2)細(xì)胞是由S·H·Madin和N·B·Darby在1958年9月從一只外觀正常的成年雌性英國(guó)小獵犬的腎分離得到的；MDCK(NBL-2)細(xì)胞角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色呈陽(yáng)性；MDCK(NBL-2)細(xì)胞被用于研究β-粥樣蛋白前體的處理及其蛋白水解產(chǎn)物。

生物安全等級(jí)1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基MEM（ATCC改良)＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:2-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

基因表達(dá)情況The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.

處理方法：

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問(wèn)題，請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細(xì)胞密度較小，無(wú)菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。

實(shí)驗(yàn)操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。

b．立即在無(wú)菌超凈臺(tái)內(nèi)用70％乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。

c．用無(wú)菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無(wú)菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無(wú)菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無(wú)菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無(wú)菌的含有無(wú)菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時(shí)試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

大鼠 PGC 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 MS4A2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 FCAMR 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 FCGRT 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 FCER1G 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 CD31 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 YWHAE 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 UCHL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 CA13 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 UCHL3 基因全長(zhǎng)ORF克隆

犬腎細(xì)胞：MDCK(NBL-2)ASMTL  ASMTL蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

HER2 receptor(1A4)   HER2受體單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Monkey IgG/APC  APC標(biāo)記的兔抗猴IgG 規(guī)格: 0.1mlMMP-2  基質(zhì)金屬蛋白-2抗體 規(guī)格: 0.1ml

CD44/HCAM/PGP1  CD44抗體 規(guī)格: 0.1mlKeratan Sulfate  硫酸角質(zhì)素抗體 規(guī)格: 0.2ml

PIBF  孕激素誘導(dǎo)阻斷因子抗體 規(guī)格: 0.2ml

HRAS+KRAS  轉(zhuǎn)化蛋白p21抗體（原基因H-ras抗體） 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155)  磷酸化組蛋白去乙酰化4/5/7抗體 規(guī)格: 0.1mlCA153/EMA/Mucin 1  相關(guān)抗原抗體 規(guī)格: 0.1ml

FAM63A  FAM63A蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Snail/SNAI 1  Snail蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Goat Anti-Mouse IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml

CCDC125  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白125抗體 規(guī)格: 0.2mlWnt8b  WNT蛋白家族Wnt8b抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-Nrf2 (Ser40)  磷酸化核因子2相關(guān)因子2(Ser40)抗體 規(guī)格: 0.1mlCrk p38 /CRK  Crk p38抗體 規(guī)格: 0.2ml