產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    小鼠真皮微血管內(nèi)皮細胞

2.組織來源：皮膚組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

小鼠真皮微血管內(nèi)皮細胞分離自真皮組織；真皮，位于表皮深層，向下與皮下組織相連，真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起，埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維，使皮膚既有彈性，又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。微血管內(nèi)皮細胞（MEC）在炎癥反應、腫瘤生長、創(chuàng)面愈合過程中起著非常重要的作用。在創(chuàng)面愈合研究領(lǐng)域，由于表皮細胞、真皮成纖維細胞體外培養(yǎng)技術(shù)的成熟，人們對這兩種細胞早已進行了大量深入的研究。與之相比，對參與創(chuàng)面愈合過程的另一種主要細胞——真皮微血管內(nèi)皮細胞，則因其體外分離培養(yǎng)技術(shù)的困難而使相關(guān)的研究受限。

5.方法簡介：

()實驗室分離的小鼠真皮微血管內(nèi)皮細胞采用膠原酶-中性混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、最后通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

()實驗室分離的小鼠真皮微血管內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-M201

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)內(nèi)皮細胞樣

傳代特性可傳2-3代

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內(nèi)用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

250mL MOPS Buffer,1.0M,pH8.0   MOPS Buffer,1.0M,pH8.0   常溫保存

100uL 玉米泛素基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存

2 ug pMG36e pMG36e 低溫運輸，-20℃保存

細菌瓊脂粉 Agar Bacteriological 250g

1瓶 SK-BR-3細胞株 SK-BR-3 低溫運輸和保存

葡萄球菌選擇性瓊脂 Staphylococcus Selective Agar 250g

5g 2,4- 二氯苯氧乙?嵌?L?

小鼠真皮微血管內(nèi)皮細胞PBS-Tween20洗液 英文名稱：PBS-Tween20 lotion 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)免疫試劑盒進口、分裝

平板計數(shù)瓊脂（PCA） 英文名稱：Plate Count Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

TTC營養(yǎng)瓊脂 英文名稱：TTC Nutrient Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬二胺氧化(DAO)免疫試劑盒*直銷

營養(yǎng)肉湯（NB） 英文名稱：Nutrient Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬兒茶胺(CA)免疫試劑盒進口、組裝

營養(yǎng)瓊脂（NA） 英文名稱：Nutrient Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬多肽YY(PYY)免疫試劑盒進口、分裝

2216E瓊脂 英文名稱：2216E　Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬多巴胺(DA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

標準I號營養(yǎng)瓊脂 英文名稱：Standard I Nutrient Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬端粒(TE)免疫試劑盒*直銷

胰胨大豆胨固綠瓊脂 英文名稱：Tryptic Soy Fast Green Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)免疫試劑盒進口、組裝

m-TGE肉湯 英文名稱：m-TGE Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬淀粉樣前體蛋白(βAPP)免疫試劑盒進口、分裝

水平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱：Water Plate Count Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 豬低氧誘導因子1α(HIF-1α)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。