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貨號	A01X752	規(guī)格	1×106
英文名稱	Hep3B2.1-7 [Hep3B] 細胞	產(chǎn)品分類	人細胞系
實驗類型	MEM+10%FBS+1% L-谷an酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸鈉 +1%P/S	報告	提供STR鑒定報告

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

名稱	Hep 3B2.1-7 (人肝癌細胞) (STR鑒定正確)
別稱	Hep 3B2_1-7; Hep 3B2; HEP-3B2; HEP3B2; Hep-3B; HEP-3B; Hep 3B; Hep3B; HEP3B
種屬	人類
年齡（性別）	男性，8歲
組織來源	肝細胞癌，肝
生長特性	貼壁細胞
細胞形態(tài)	上皮細胞樣
背景描述	Hep 3B2.1-7細胞是來自8歲男性黑人的組織。Hep 3B2.1-7細胞的染色體模式數(shù)目為60，在裸鼠中能致瘤。Hep 3B2.1-7細胞整合了完整的乙型肝炎病毒基因組，需在2級生物安全防護下操作。
生物安全等級	2
生長培養(yǎng)基	MEM＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例	1:2-1:3
推薦換液頻率	2~3次/周
倍增時間	~40-50小時
凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃
致瘤性	Yes, in nude mice.
基因表達情況	alpha fetoprotein (alpha-fetoprotein); hepatitis B surface antigen (HBsAg); albumin; alpha2 macroglobulin (alpha-2-macroglobulin); alpha1 antitrypsin (alpha-1-antitrypsin); transferrin;, alpha1 antichymotrypsin (alpha-1-antichymotrypsin); haptoglobin; ceruloplasmin; plasminogen; complement (C3, C4); C3 activator; fibrinogen; alpha1 acid glycoprotein (alpha-1 acid glycoprotein);, alpha2 HS glycoprotein (alpha-2-HS-glycoprotein); beta lipoprotein (beta-lipoprotein); retinol binding protein (retinol-
保藏機構(gòu)	ATCC; HB-8064 BCRC; 60434 BCRJ; 0357 DSMZ; ACC-93 ECACC; 86062703

細胞傳代：

1. Hep3B2.1-7 [Hep3B] 人肝癌細胞試驗準(zhǔn)備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養(yǎng)皿，離心管。

2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。

3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細胞從壁上脫落下來為止。

4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。

5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細胞分散開。

6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。

7. 用培養(yǎng)液重懸細胞，細胞計數(shù)后選擇 0.8X106 個細胞加入一個 35mm 培養(yǎng)皿。

8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。

9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉(zhuǎn)染。

細胞轉(zhuǎn)染：

1. 轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備

① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。

② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。

2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細胞。在一個轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。

泛su連接meiSiah2	牛棒桿菌PCR檢測試劑盒
點狀古柏線蟲PCR試劑盒	丁型肝炎IgMELISA試劑盒
人β淀粉樣多肽42(Aβ 42)試劑盒ELISA	蛋白精氨suan脫亞氨mei4ELISA試劑盒
人玻連蛋白(VTN)試劑盒ELISA	半蛋白mei抑制劑11ELISA試劑盒
人脂磷壁suan(LTA)檢測試劑盒elisa	蛋白O-巖藻糖基轉(zhuǎn)移mei2ELISA試劑盒
人凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)ELISA試劑盒	白介su1RαELISA試劑盒
高爾基體自身蛋白8B封閉多肽	肉毒桿菌B型（CB-B）核suan檢測試劑盒
脫氧三磷suan核苷水解mei封閉多肽	葡萄孢菌PCR試劑盒
cereblon蛋白封閉多肽	兔出血癥病毒通用型(RHDV)核suan檢測試劑盒
腫瘤高表達細胞周期相關(guān)蛋白封閉多肽	間日瘧PCR檢測試劑盒
COMM結(jié)構(gòu)域蛋白4封閉多肽	馬隱秘桿菌PCR試劑盒
硫氧還蛋白還原mei封閉多肽	Hep3B2.1-7 [Hep3B] 人肝癌細胞茄病鐮刀菌PCR檢測試劑盒
白細胞介su18結(jié)合蛋白封閉多肽	蘄蛇探針法PCR鑒定試劑盒
GalNAc-T6蛋白封閉多肽	曼那角病毒RT-PCR試劑盒
NADH氧化還原mei輔mei10封閉多肽	馬隱秘桿菌PCR試劑盒

細胞培養(yǎng)實驗基本操作：
①進無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細胞使用。