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貨號	A01X1005	規格	1×106
英文名稱	U-2 OS細胞	產品分類	人細胞系
實驗類型	MACOY'S 5A+10%FBS+1%P/S	報告	提供STR鑒定報告

公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

名稱	U-2 OS [U2OS] (人骨肉瘤細胞) (STR鑒定正確)
別稱	U-2 OS; U-2OS; U-2-OS; U2-OS; U20-S; U20S; 2T
種屬	人類
年齡（性別）	女性，15歲
組織來源	骨；骨肉瘤
生長特性	貼壁細胞
細胞形態	上皮細胞樣
背景描述	U-2 OS細胞(原名2T)是由Ponten·J和Saksela·E在1964年從一名15歲女孩的脛骨中等分化的肉瘤中分離建立的。U-2 OS細胞與WI-38細胞共培養或用抗猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒的補體結合試驗(CF法)未檢測到病毒。U-2 OS細胞表達胰島素樣生長因子I、II(IGF-I、IGF-II)受體和骨肉瘤衍生生長因子(ODGF)。
生物安全等級	1
生長培養基	McCoy's 5A＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例	1:3-1:4
推薦換液頻率	2~3次/周
倍增時間	~25-30小時
凍存條件	凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮
培養條件	氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃
受體表達情況	insulin-like growth factor I (IGF-I);insulin-like growth factor II (IGF II)
抗原表達情況	Blood Type A; Rh+; HLA A2, Aw30, B12, Bw35, B40(+/-)
基因表達情況	osteosacoma derived growth factor (ODGF), Blood Type A; Rh+; HLA A2, Aw30, B12, Bw35, B40(+/-)
保藏機構	ATCC; HTB-96 DSMZ; ACC-785 ECACC; 92022711

細胞傳代：

1. U-2 OS人成骨肉瘤細胞試驗準備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養皿，離心管。

2. 棄掉培養皿中的培養基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。

3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養瓶壁，觀察到細胞從壁上脫落下來為止。

4. 加入 1ml 的含血清培養基終止反應。

5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細胞分散開。

6. 將培養液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。

7. 用培養液重懸細胞，細胞計數后選擇 0.8X106 個細胞加入一個 35mm 培養皿。

8. 將合適體積培養液加入離心管中，混勻細胞后輕輕加入培養皿中，使其均勻分布。

9. 將培養皿轉入 CO2培養箱中培養，第二天轉染。

細胞轉染：

1. 轉染試劑的準備

① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。

② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。

2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質體體積：DNA 質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養基。加入合適質量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉染試劑，再次震蕩。

CRB2蛋白封閉多肽	莢膜組織胞漿菌馬皮疽變種PCR檢測試劑盒說明書
極小棒桿菌PCR試劑盒	輔meiQ10ELISA試劑盒
人布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)ELISA試劑盒	鯡精胺激meiELISA試劑盒
人c-sis ELISA試劑盒	表皮細胞生長因子受體ELISA試劑盒
人組織型纖溶mei原激活劑(t-PA)試劑盒ELISA	防御suβ134ELISA試劑盒
人SWI/SNF相關, 基質關聯,肌動蛋白依賴染色質調控因子,亞家族c,成員1(SMARCC1)檢測試劑盒elisa	3型1-磷suan鞘氨醇受體ELISA試劑盒
細胞表面趨化因子受體6（CD196）封閉多肽	豬胸膜肺炎放線桿菌PCR試劑盒
凋亡加強結構域蛋白8封閉多肽	牡蠣包拉米蟲PCR試劑盒
DNA聚合meiα2封閉多肽	結腸彎曲桿菌PCR試劑盒
整合suα1封閉多肽	玉米內源基因PCR檢測試劑盒
DNA聚合meiα2封閉多肽	牛輪狀病毒通用PCR檢測試劑盒
負調控因子白細胞介su2封閉多肽	U-2 OS人成骨肉瘤細胞耐久腸球菌PCR試劑盒
細胞質分裂付出蛋白1封閉多肽	牡蠣包拉米蟲PCR試劑盒
Rho GTPmei激活蛋白24封閉多肽	牛羚關聯惡性卡他熱病毒PCR試劑盒
氧化還原meiNDOR1封閉多肽	牛流行熱病毒RT-PCR試劑盒

細胞培養實驗基本操作：
①進無菌室前要洗手，按規定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內的培養液成分如蛋白質等燒焦后會產生有害物質，吸管再用時會將其帶到培養液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產生有毒氣體，危害培養細胞，同時塑料細胞培養用品也會產生變形影響使用。
③使用培養液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養液應立即封閉瓶口，培養的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發現吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發現原有的細胞遺傳物發生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。