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微生物培養基配置一般過程

時間:2025/2/17閱讀:220
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培養基( culture medium)是人工配制的,適合微生物生長、分離鑒別的營養基礎。一般基礎培養基中古有蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、瓊脂等基本營養物質。微生物培養基應用范圍很廣。例如,無菌試驗培養基可檢查藥品、生物制品是否污染細菌,它直接關系到人民用藥安全;在臨床及食品衛生檢驗中常用選擇、鑒別培養基,此類培養基中根據用途不同,需要加入抑菌劑、指示劑、血液、糖等試劑,以利于特定細菌的分離與鑒別,需要使細菌大量生長、繁殖的各類培養基;病毒培養及疫苗中則需用組織細胞培養液,主要成分為多種氨基酸、核苷酸、無機鹽、生長因子等。

 

配置微生物培養基一般過程:

1、準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養基,培養基所需試劑必須純凈。

2、校正pH值:將稱量好的培養基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1NNaOH和1N HCl調節pH值到適宜范圍內。

3、過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養基倒入其中過濾至透明。

4、分裝:將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。

5、滅菌:培養基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。

配置微生物培養基注意事項:

1、根據不同微生物的營養需要配制不同的培養基。

2、注意各種營養物質的濃度及合適配比,保持合適滲透壓。

3、將培養基的 pH 控制在適宜的范圍之內,以利于不同類型微生物的生長繁殖或代謝產物的積累。

4、要注意各種原料的配比,每種培養基的配比合適的配比,可以按照老師的要求去做。

5、如需要加熱的時候注意時間的把握。

 


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