ELISA試劑盒中通常有3次加樣步聚，即加標(biāo)本，加酶聯(lián)絡(luò)物，加底物。
加標(biāo)本通常用微量加樣器，按規(guī)矩的量參與板孔中。
每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴，以發(fā)生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。
有此測(cè)定(如間接法ELISA)需用稀的血清，可在試管中按規(guī)矩的稀釋度稀釋后再加樣。
也可在板孔中參與稀釋液，再在其參與血清標(biāo)本，然后在微型轟動(dòng)器上轟動(dòng)1分鐘以確保混和。
單克隆抗體的運(yùn)用使測(cè)定抗原的ELISA試劑盒前進(jìn)到新水平。
ELISA試劑盒這種雙位點(diǎn)一步不但簡(jiǎn)化了操作，縮短了反應(yīng)時(shí)間，如運(yùn)用高親和力的單克隆抗體，測(cè)定的敏感性和特異性也顯著前進(jìn)。
加酶聯(lián)絡(luò)物運(yùn)用液和底物用液時(shí)可用定量多道加液器，使加液進(jìn)程迅速結(jié)束。
在雙抗體夾心法測(cè)定抗原時(shí)，如運(yùn)用關(guān)于抗原分子上兩個(gè)不一樣抗原決定簇的單克隆抗體別離作為固相抗體和酶標(biāo)抗體。
加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并留心不可濺起，不可發(fā)生氣泡。
ELISA試劑盒則在測(cè)守時(shí)可使標(biāo)本的參與和酶標(biāo)抗體的參與兩步并作一步。
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