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大鼠多巴胺 (Dopamine) ELISA 檢測試劑盒

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本試劑僅供研究使用      標本:組織勻漿


試驗原理

Dopamine試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA.已知Dopamine濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將Dopamine和*標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中Dopamine的濃度呈比例關系。


試劑盒內容及其配制

試劑盒成份(2-8℃保存)

96孔配置

48孔配置

配制

96/48人份酶標板

1塊板(96T

半塊板(48T

即用型

塑料膜板蓋

1

半塊

即用型

標準品:1600ng/L

1瓶(0.6ml

1瓶(0.3ml

按說明書進行稀稀

空白對照

1瓶(1.0ml

1瓶(0.5ml

即用型

標準品稀釋緩沖液

1瓶(5ml

1瓶(2.5ml

即用型

*標記的抗Dopamine抗體

1瓶(6ml

1瓶(3.0ml

即用型

親和鏈酶素-HRP

1瓶(10ml

1瓶(5.0ml

即用型

洗滌緩沖液

1瓶(20ml

1瓶(10ml

按說明書進行稀釋

底物A

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

即用型

底物B

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

即用型

終止液

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

即用型

標本稀釋液

1瓶(12ml

1瓶(6.0ml

即用型


自備材料

  1. 蒸餾水。
  2. 加樣器:5ul、10ul50ul100ul200ul、500ul、1000ul。
  3. 振蕩器及磁力攪拌器等。


安全性

  1. 避免直接接觸終止液和底物AB。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
  2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
  3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。


操作注意事項

  1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
  2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
  3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
  4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物AB液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
  5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
  6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
  7. 底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
  8. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
  9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。


樣品收集、處理及保存方法

  1. 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
  2. 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
  3. 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
  4. 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
  5. 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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