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索氏提取法

時間:2013-7-22閱讀:942
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索氏提取
一、原理
利用溶劑回流和虹吸原理,使固體物質每一次都能為純的溶劑所萃取,所以萃取效率較高。萃取前應先將固體物質研磨細,以增加液體浸溶的面積。然后將固體物質放在濾紙套內,放置于萃取室中。如圖安裝儀器。當溶劑加熱沸騰后,蒸汽通過導氣管上升,被冷凝為液體滴入提取器中。當液面超過虹吸管zui高處時,即發生虹吸現象,溶液回流入燒瓶,因此可萃取出溶于溶劑的部分物質。就這樣利用溶劑回流和虹吸作用,使固體中的可溶物富集到燒瓶內。
二、儀器
索氏提取器,干燥器(直徑15~18cm,盛變色硅膠),不銹鋼鑷子(長20cm),培養皿,分析天平(感量0.001g),稱量瓶,恒溫水浴,烘箱,樣品篩(60目)。
三、操作步驟
1、切片
將濾紙切成8cm×8cm,疊成一邊不封口的紙包,用硬鉛筆編寫順序號,按順序排列在培養皿中。將盛有濾紙包的培養皿移入105±2℃烘箱中干燥2h,取出放入干燥器中,冷卻至室溫。按順序將各濾紙包放人同一稱量瓶中稱重(記作a)、稱量時室內相對濕度必須低于70%。  
2、包裝和干燥
在上述已稱重的濾紙包中裝入3g左右研細的樣品,封好包口,放入105±2℃的烘箱中干燥3h,移至干燥器中冷卻至室溫。按順序號依次放入稱量瓶中稱重(記作b)。
3、抽提
將裝有樣品的濾紙包用長鑷子放入抽提筒中,注入一次虹吸量的1.67倍的無水yi醚,使樣品包*浸沒在yi醚中。連接好抽提器各部分,接通冷凝水水流,在恒溫水浴中進行抽提,調節水溫在70~80℃之間,使冷凝下滴的yi醚成連珠狀(120~150滴/min或回流7次/h以上),抽提至抽取筒內的yi醚用濾紙點滴檢查無油跡為止(約需6~12h)。抽提完畢后,用長鑷子取出濾紙包,在通風處使yi醚揮發(抽提室溫以12~25℃為宜)。提取瓶中的yi醚另行回收。
4、稱重
待yi醚揮發之后,將濾紙包置于105±2℃烘箱中干燥2h,放入干燥器冷卻至恒重為止(記作c)。
四、結果與計算
粗脂肪含量(%)=(b-c)/(b-a)×100
式中:a:稱量瓶加濾紙包重(g)
b:稱量瓶加濾紙包和烘干樣重(g)
c:稱量瓶加濾紙包和抽提后烘干殘渣重(g)
五、注意事項
1.測定用樣品、抽提器、抽提用有機溶劑都需要進行脫水處理。
抽提體系中有水,會使樣品中的水溶性物質溶出,導致測定結果偏高;抽提體系中有水,則抽提溶劑易被水飽和(尤其是yi醚,可飽和約2%的水),從而影響抽提效率;樣品中有水,抽提溶劑不易滲入細胞組織內部,結果不易將脂肪抽提干凈。
2.試樣粗細度要適宜。
試樣粉末過粗,脂肪不易抽提干凈;試樣粉末過細,則有可能透過濾紙孔隙隨回流溶劑流失,影響測定結果。
3.索氏抽提法測定脂肪zui大的不足是耗時過長。
如能將樣品先回流1~2次,然后浸泡在溶劑中過夜,次日再繼續抽提,則可明顯縮短抽提時間。
4.必須十分注意yi醚的安全使用。
抽提室內嚴禁有明火存在或用明火加熱。yi醚中不得含有過氧化物,保持抽提室內良好通風,以防燃爆。yi醚中過氧化物的檢查方法是:取適量yi醚,加入*溶液,用力搖動,放置1min,若出現黃色則表明存在過氧化物,應進行處理后方可使用。處理的方法是:將yi醚放入分液漏斗,先以1/5yi醚量的稀KOH溶液洗滌2~3次,以除去乙醇;然后用鹽酸酸化,加入1/5yi醚量的FeSO4或Na2SO3溶液,振搖,靜置,分層后棄去下層水溶液,以除去過氧化物;zui后用水洗至中性,用無水CaCl2或無水Na2SO4脫水,并進行重蒸餾。

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