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人肺腺癌細胞(轉染TK基因的GLC-82細胞)

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更新時間:2016-07-06 05:53:05瀏覽次數(shù):223次

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【細胞凍存】將貼壁細胞消化后離心收集,懸浮細胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日人肺腺癌細胞(轉染TK基因的GLC-82細胞)保存到液氮中。
A09019 甲胎蛋白異質體2(αFPL2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein Lens Culinaris Agglutinin 2 (aFPL2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09020 成纖維細胞生長因子23(FGF23)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 23 (FGF23) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09021 CCAAT增強子結合蛋白γ(CEBPγ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for CCAAT/Enhancer Binding Protein Gamma (CEBPg) 48T/96T Homo sapiens (Human)
【細胞株傳代】貼壁細胞:對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
懸浮細胞:一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
如何選用特殊細胞系培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之,*MEM做粘附細胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細胞培養(yǎng)是一個好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)*AIM V(12005)培養(yǎng)基(SFM)。
L-*在細胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
L-*在細胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養(yǎng)細胞的能量來源、參與蛋白質的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。L-*的降解導致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?
GlutaMAX-I 二肽是一個L-*的衍生物,其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-*來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
如何用臺盼蘭計數(shù)活細胞?
用無血清培養(yǎng)基把細胞懸液稀釋到200~2000個/毫升,在0.1毫升的細胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數(shù)分鐘后,用血球計數(shù)板計數(shù)細胞。活細胞排斥臺盼蘭,因而染成藍色的細胞是死細胞。
A08999 線粒體超氧化物歧化酶(SOD2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial (SOD2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09000 腸堿性磷酸酶(ALPI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Intestinal (ALPI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09001 早期生長應答因子4(EGR4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Early Growth Response Protein 4 (EGR4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09002 35kDa核孔蛋白(NUP35)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nucleoporin 35kDa (NUP35) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09003 37kDa核孔蛋白(NUP37)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nucleoporin 37kDa (NUP37) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09004 *S轉移酶κ1(GSTκ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Kappa 1 (GSTk1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09005 *S轉移酶π1(GSTπ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Pi (GSTp) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09006 肝腎骨堿性磷酸酶(ALPL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Liver/Bone/Kidney (ALPL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09007 骨涎蛋白(BSP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Bone Sialoprotein (BSP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09008 *ⅩⅢA1肽(F13A1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Coagulation Factor XIII A1 Polypeptide (F13A1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09009 腦指蛋白(BFP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Brain Finger Protein (BFP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09010 核基質蛋白4(NMP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nuclear Matrix Protein 4 (NMP4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09011 胎兒腎鈣黏蛋白(KCAD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cadherin, Fetal Kidney (KCAD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09012 花生四烯酸(AA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Arachidonic Acid (AA) 48T/96T General
A09013 低密度脂蛋白(LDL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Low Density Lipoprotein (LDL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09014 肌細胞生成素(MYOG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Myogenin (MYOG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09015 85kDa核孔蛋白(NUP85)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nucleoporin 85kDa (NUP85) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09016 107kDa核孔蛋白(NUP107)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nucleoporin 107kDa (NUP107) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09017 中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neutrophil Alkaline Phosphatase (NAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
A09018 甲胎蛋白異質體1(αFPL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein Lens Culinaris Agglutinin 1 (aFPL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
 

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