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人肝癌細(xì)胞系

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更新時間:2016-06-27 03:02:13瀏覽次數(shù):251次

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【細(xì)胞凍存】將貼壁細(xì)胞消化后離心收集,懸浮細(xì)胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細(xì)胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日人肝癌細(xì)胞系保存到液氮中。
A07966 小鼠白介素-12(P40) IL-12(P40) Mouse IL-12(P40)ELISA KIT 96T/48T
A07967 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子-D(VEGF-D) Mouse VEGF-D(h) ELISA kit 96T/48T
A07968 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4) Mouse IGFBP4 ELISA kit 96T/48T
A07969 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1) Mouse IGFBP1 ELISA Kit 96T/48T
A07970 小鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF) Mouse HGF ELISA kit 96T/48T
A07971 小鼠的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3(VEGFR3) Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 3(Flt-4)—ELISA kit 96T/48T
【細(xì)胞株傳代】貼壁細(xì)胞:對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞:一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長??傊?,*MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)*AIM V(12005)培養(yǎng)基(SFM)。
L-*在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
L-*在細(xì)胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。L-*的降解導(dǎo)致氨的形成,而氨對于一些細(xì)胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?
GlutaMAX-I 二肽是一個L-*的衍生物,其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-*來保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類細(xì)胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應(yīng),培養(yǎng)細(xì)胞,尤其是哺乳類細(xì)胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
如何用臺盼蘭計數(shù)活細(xì)胞?
用無血清培養(yǎng)基把細(xì)胞懸液稀釋到200~2000個/毫升,在0.1毫升的細(xì)胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數(shù)分鐘后,用血球計數(shù)板計數(shù)細(xì)胞?;罴?xì)胞排斥臺盼蘭,因而染成藍(lán)色的細(xì)胞是死細(xì)胞。
A07950 小鼠CD26 Mouse CD26 ELISA Kit 96T/48T
A07951 小鼠CD40L Mouse CD40L ELISA Kit 96T/48T
A07952 小鼠CINC-1 Mouse CINC-1 ELISA Kit 96T/48T
A07953 小鼠CINC-2a/b Mouse CINC-2a/b ELISA Kit 96T/48T
A07954 小鼠CINC-3 Mouse CINC-3 ELISA Kit 96T/48T
A07955 小鼠CXCL2/MIP-2 Mouse CXCL2/MIP-2 ELISA Kit 96T/48T
A07956 小鼠CXCL9/MIG Mouse CXCL9/MIG ELISA Kit
A07957 小鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13) Mouse BLC-1/CXCL13 ELISA Kit 96T/48T
A07958 小鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子10(CXCL11) Mouse CXCL10 ELISA Kit 96T/48T
A07959 小鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子12(CXCL12) Mouse CXCL12 ELISA Kit 96T/48T
A07960 小鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子16(CXCL16) MouseCXCL16 ELISA Kit 96T/48T
A07961 小鼠CCL1 Mouse CCL1 ELISA Kit 96T/48T
A07962 小鼠*型血漿酶原激活因子(uPA)ELISA kit Mouse uPA ELISA kit 96T/48T
A07963 小鼠*型血漿酶原激活因子受體(uPAR) Mouse uPAR ELISA kit 96T/48T
A07964 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子-B(VEGF-B) Mouse VEGF-B ELISA kit 96T/48T
A07965 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子-C(VEGF-C)ELISA kit Mouse VEGF-C ELISA kit 96T/48T
 

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