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表達HBV病毒的人肝細胞 , HepG2.2.15細胞

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更新時間:2016-09-09 04:35:20瀏覽次數:257次

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表達HBV病毒的人肝細胞 , HepG2.2.15細胞原代或傳代提供,高活性、無污染(不含原蟲、霉菌、細菌、黑蛟蟲、真菌、支原體等污染物質)。生長特性:貼壁、懸浮、半貼壁
傳代時間:2-4天/3-5天
傳代比例:1:2-1:3 1:1-1:2

表達HBV病毒的人肝細胞 , HepG2.2.15細胞5×10^5以上/1ml
對于大多數細胞研究工作者來說,表達HBV病毒的人肝細胞 , HepG2.2.15細胞污染那可是個糟糕的事情,也是比較容易出現的情況,我們如何防范,如何避免,是我們要學習和掌握的。
豬流感病毒A(FLU A)ELISA試劑盒 Porcine Influenza viruses A,FLU A ELISA KIT 96T/48T
豬孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒 Porcine Progesterone,PROG ELISA KIT 96T/48T
豬白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒 Porcine Interleukin 5,IL-5 ELISA KIT 96T/48T
豬層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒 Porcine Laminin,LN ELISA KIT 96T/48T
豬Ⅱ型膠原(Col Ⅱ) ELISA試劑盒 Porcine Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA KIT 96T/48T
豬可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒 Porcine soluble E-selectin,sE-selectin ELISA KIT 96T/48T
豬白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 Porcine Interleukin 13,IL-13 ELISA KIT 96T/48T
豬轉化生長因子β2(TGF-β2)ELISA試劑盒 Porcine Transforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA KIT 96T/48T
下面我們對細胞培養中常見的污染情況,做個總結:
1)原蟲:培養液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態不好,邊緣不清楚,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養。這種共生是非常普遍的,但他們的數量小,細胞站優勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長,zui終形成惡性循環。
2)霉菌:培養液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質,37度孵箱培養2-3天,仍清亮,但出現絮狀雜質,鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態變差,用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內,再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅。或者在培養箱的托盤加入飽和的消毒*高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉移,采用過氧乙酸擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把過氧乙酸放置在孵箱內一個小時,使其蒸汽彌漫。待過氧乙酸的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節。其它培養箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預防霉菌污染,可在培養基里加3u/ml的兩性霉素或*或*或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,*或*或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞。,將環境*消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統污染,檢查一下培養基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
3)細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據感染細菌的不同,可有不同的外形,培養液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養液接觸的移液管等物品,連續兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養液是否存在渾濁的現象! 可在培養液中加相應的抗生素處理
4)黑蛟蟲:可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,低倍下為黑色點狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養液也是不渾的,一般不會太影響,細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態良好,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養液顏色、透明度無明顯變化,可在同一批號的血清養的細胞中發現類似現象。對細胞生長狀態不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之后會自然消失,除更換血清外無須特殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話,可以增加細胞的種板密度,以提高細胞的生存率。
5)真菌:一般培養液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細胞碎片分不清,慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢,不象細菌那么容易被發現,但是一旦發現有它的存在細胞就被污染了,也很難救活了。
6)支原體:黑色的,好象多為多形,培養液一般培養液一般會渾濁,原體感染,國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后,細胞病變不很明顯,只是慢慢死去。用泰樂菌素,獸用支原體病的藥,但可用于細胞培養,無任何不良反應。Sigma公司的使用時用50ug/ml Tylosin培養液培養6天或連續傳兩代即可清除支原體污染。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度。
污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環境問題等等關于培養基的無菌狀況,取培養基至培養瓶中(不加細胞),37度試培養一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。 也可以在培養基中事先加入雙抗(*和氨芐*)。但雙抗有時會影響細胞的狀態,所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結果。1、孵箱應定期用三氧機消毒或者 紫外光照射,并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內的水應是三蒸水2、超凈臺\取材\器材\培養液\培養瓶\操作等因素3、超凈臺的風機不能過大,風機到6-8格。否則也可能能致霉菌污染4、無菌室經甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的氨水噴灑中和,約幾小時即可進入操作。
豚鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒 guinea pig hepatocyte growth factor,HGF ELISA KIT 96T/48T
豚鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 guinea pig Interferon γ ,IFN-γ ELISA KIT 96T/48T
豚鼠端粒酶(TE)ELISA試劑盒 guinea pig omerase,TE ELISA KIT 96T/48T
豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 guinea pig follicle-stimulating hormone,FSH ELISA KIT 96T/48T
豚鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒 guinea pig intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA KIT 96T/48T
豚鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒 Guinea pig Epidermal growth factor,EGF ELISA KIT 96T/48T
豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒 guinea pig Leukotriene B4,LT-B4 ELISA KIT 96T/48T
豚鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 guinea pig Interleukin 6,IL-6 ELISA KIT 96T/48T
豚鼠過氧化脂質/乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒 Guinea Pig lipid peroxlde,LPO ELISA KIT 96T/48T
豚鼠晚期糖基化終末產物(AGEs)ELISA試劑盒 Guinea Pig advanced glycation end products,AGEs ELISA KIT 96T/48T
豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒 Guinea Pig Interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra ELISA KIT 96T/48T
豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒 Guinea Pig monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA KIT 96T/48T
豬低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒 Procine hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α ELISA KIT 96T/48T
豬鈉-葡萄糖共轉運載體1(BPLT1)ELISA試劑盒 Porcine sodium-glucose cotransporter 1,BPLT1 ELISA KIT 96T/48T
豬松弛肽/松弛素(RLN)ELISA試劑盒 Porcine Relaxin,RLN ELISA KIT 96T/48T
 

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