小鼠ELISA試劑盒揭示小鼠氣道反應(yīng)性的檢測(cè)，目前國內(nèi)在對(duì)支氣管哮喘 ( 簡(jiǎn)稱哮喘) 小鼠的評(píng)價(jià)上多數(shù)僅僅立足于氣道炎性指標(biāo) ,在氣道反應(yīng)性的檢測(cè)方面近幾年才起步 ,而且是用有創(chuàng)的方法。我所從國外引進(jìn)了動(dòng)物*檢測(cè)的* 。*后再測(cè)定動(dòng)物氣道阻力的有創(chuàng)法是評(píng)價(jià)動(dòng)物氣道反應(yīng)性的經(jīng)典方法 。 *法則不需*等繁瑣的步驟 ,在動(dòng)物處于自然狀態(tài)下就可以直接測(cè)定其氣道反應(yīng)性 ,而且每次可以同時(shí)檢測(cè)多只小鼠 ,具有較大的*性 ,但能否取代有創(chuàng)法尚需更多的數(shù)據(jù) 。 因此 ,我們有必要探討其與有創(chuàng)法的相關(guān)性 ,判定其是否能夠有效檢測(cè)動(dòng)物的氣道反應(yīng)性 ,以期建立哮喘小鼠氣道反應(yīng)性的*檢測(cè)方法 。
    儀器小鼠**和有創(chuàng)*，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SP F 級(jí) BALB/ c 雌鼠 ,5～6 周齡 ,體質(zhì)量 18～20 g 。
    哮喘模型的建立方法
    實(shí)驗(yàn)第 0 天 、 第 7 天和第 14 天行腹腔注射致敏 :模型組每次給予 20μ g OV A + 150μ l Al (O H) 3 + 50 μ l N S( 100 mg/ L ) 混懸液 ; 對(duì)照組給予 200 μ l N S 。 實(shí)驗(yàn)第 28 天 、 第 29 天和第 30 天行滴鼻激發(fā) ; 模型組每次給予50 μ l OV A2 N S ( 2 g/ L ) 滴鼻 ,對(duì)照組給予 50 μ l N S 。
    氣道反應(yīng)性的檢測(cè)
    實(shí)驗(yàn)第 32 天 , 首先 , 連接好 B u xco **并定標(biāo) 。將自然狀態(tài)下的 BALB/ c 小鼠置入體描箱中 ,先測(cè)定基礎(chǔ) Pe n h 值 ; 隨后用 Mc h 激發(fā) , 濃度由低到高依次為 0 、 0 . 20 、 0 . 39 、 0 . 78 、 1 . 56 、 3 . 12 、 6 . 25 、12 . 5 、 25 和 50 g/ L ,記錄此時(shí)的 Pe n h 值 ,每次霧化吸入 2 mi n ,記錄3 mi n 。 有創(chuàng)組則是將小鼠行*后用 B u xco 有創(chuàng)*測(cè)定其 RL 值 。
    氣道反應(yīng)性檢測(cè)后行支氣管肺泡灌洗 ( PB S 0 . 8 ml × 3 次) , 回收支氣管肺泡灌洗液 , 離心 , 細(xì)胞沉淀重懸 ,取部分計(jì)算細(xì)胞總數(shù) ,余下部分制備涂片 , H E 染色后行細(xì)胞分類計(jì)數(shù) , 每張涂片計(jì)數(shù) 400 個(gè)細(xì)胞 , 記錄各種細(xì)胞數(shù)目。
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果以 ? x ±s 表示為進(jìn)行*組和有創(chuàng)組氣道反應(yīng)性相關(guān)分析，分別將每個(gè) Mc h 激發(fā)濃度下的Pe n h 與 RL 組轉(zhuǎn)換為與 N S 激發(fā)的基礎(chǔ)值的百分比 ( Mc h 激發(fā)的 Pe n h 值或 RL 值/ N S 激發(fā)的 Pe n h 值或 RL值 × 100 %) 來表示 。 采用 SPSS 11 . 0統(tǒng)計(jì)軟件分析 ,兩組樣本均數(shù)進(jìn)行 t 檢驗(yàn)或相關(guān)分析 , P < 0 . 05 、P <0 . 01表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 。