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249次我們增加了一步保護(hù)酶標(biāo)板的程序。在10mM的磷酸鹽中加入適量的糖、無關(guān)蛋白質(zhì)、ELISA試劑盒*以及二價金屬離子，作為酶標(biāo)板保護(hù)劑，在封閉完后加入保護(hù)液于4℃冰箱中孵育過夜，同時與未做保護(hù)的酶標(biāo)板進(jìn)行對照，然后將保護(hù)的及未保護(hù)的酶標(biāo)板置于37烘箱中放置15天，考察保護(hù)液對酶標(biāo)板的穩(wěn)定性的影響。
不僅由于在凍干的過程中會影響酶標(biāo)抗體的活性，而且在臨床應(yīng)用中頗為不便。適當(dāng)?shù)木彌_液以及添加無關(guān)蛋白質(zhì)、糖、防腐劑以及一些含氨基的化合物等都會對對酶標(biāo)抗體的活性起一定的保護(hù)作用，因此我們設(shè)計了一組保護(hù)劑用于保護(hù)酶標(biāo)抗體，ELISA試劑盒與未添加任何糖蛋白的酶標(biāo)抗體做對照，將經(jīng)保護(hù)的酶標(biāo)抗體及未保護(hù)的酶標(biāo)抗體置于37℃烘箱中放置6天，考察保護(hù)液對酶標(biāo)抗體的影響。
包被抗原時，為了得到*的包被效果，我們采用了碳酸鹽緩沖液(50mM ph9.6 )、磷酸鹽緩沖液(50mM ph7.6)、以及TRIS鹽酸緩沖液(50 mM ph7.6)三種緩沖液作為包被液，抗原包被濃度為5ug/ml，及2.5ug/ml,酶標(biāo)抗體工作濃度為1：400及1：300，用自動酶標(biāo)儀分析，選擇*的包被緩沖液系統(tǒng)。同時為了保證緩沖液能夠長期保存，我們在包被液中添加了0.01%的硫柳汞作為防腐劑。ELISA試劑盒酶標(biāo)板經(jīng)過封閉后在低溫下僅能存放2周左右，為了延長固相酶標(biāo)板上抗原的穩(wěn)定性，
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