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ELISA試劑盒技術是一種敏感度高、特異性強、重復性好的實驗診斷方法,其試劑具有穩定、易保存、操作簡便、結果判斷較客觀等優點,并且不但適用于大規模篩查試驗又可以用于少量標本的檢測,既可以做定性試驗又可以做定量分析等很多優勢,已經在微生物學、寄生蟲學、腫瘤學和細胞因子等領域獲得了廣泛的應用。
但是ELISA試劑盒實驗的影響因素較多,研究分析過程中加強質量管理才能充分發揮其方法學的優點。
分析前質控
檢驗人員在進行ELISA實驗前必須要需經過專業的培訓,熟練掌握相關技術知識:
◎檢驗項目的基本原理 (ELISA實驗原理);
◎ELISA臨床意義;
◎熟悉檢測技巧,了解易出差錯的環節及難點;
◎熟悉檢測試劑性能(包括ELISA試劑盒組成,包被片段及其組成);
◎ 熟悉檢測儀器的原理及性能;掌握數據處理的能力和質量控制知識。
◎某些特殊項目的檢測如抗HIV等需經有關部門組織的專門培訓班,考試合格后持證上崗。
◎1971年Engvall等人把免疫組化的EIA技術應用于臨床檢驗發展為ELISA技術。
特點 :在固相表面組裝免疫活性物質形成"免疫吸附劑"
酶標記免疫活性物質,進行信號放大;
有二步溫育反應二次洗滌過程;
靈敏度特異性相對較高。
ELISA試劑盒局限性:只能檢測到ng水平
精密度差(批內CV15-20%);
線性范圍窄(一個數量級);
存在"HD-HOOK"效應。
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