日韩毛片在线视频-日韩毛片在线影视-日韩美aaa特级毛片-日韩美a一级毛片-久久夜夜操妹子-久久夜夜肉肉热热日日

上海金穗生物科技有限公司
免費會員

gⅥ-cDNA融合噬菌體親和選擇

時間:2013-3-11閱讀:350
分享:

每一輪的親和選擇包括原始的或富集的gⅥ—cDNA文庫中噬菌粒顆粒的獲取和純化以及它們自身的淘選過程。介紹兩種不同的方法來抽提特異的噬菌體。

1噬菌體文庫的獲取和純化
在每輪淘選循環中的起始部分,(富集的)Topl0F,細胞經輔助噬菌體被雙重感染以便產生和純化gⅥ—cDNAt噬菌粒顆粒,從而進行下一輪的淘選。在淘選過程中,如果沒有特異的緩沖液且噬菌體對誘餌的親和力較高(如免疫親和篩選),此時經雙重感染獲得的噬菌體顆粒并不一定要純化。

2*化的誘餌的制備
用不同的配體標準化淘選的一個方法是用普通的標記物(如*)來標記誘餌,或使用鏈霉親和素包被的酶聯免疫吸附實驗(ELISA)的平板孔或小珠來淘選。兩個有效的(氨基反應的)*化試劑是二硫化N—羥基丁二酰亞胺*酯(biotin disulfide N—hydrox—ysuccinimideester)和*化*—N—羥基丁二酰亞胺(biotinamidocaproate N—hydroxysuccinimide)(Sigma)。與后者試劑相比,前者在*和誘餌之間有一個可切斷的二硫鍵,它是在生物淘選過程中特異抽提(用50mmol/L二硫蘇糖醇)噬菌體的試劑,整個*的水平可用HABA方法來評估。

3用*化的誘餌的淘選過程
在用*化的誘餌來親和純化gⅥ—cDNA噬菌體顆粒的標準過程中,用鏈霉親和素包被的磁珠預處理噬菌粒文庫,以便首先除去與*非特異結合的噬菌體顆粒。在第三輪淘選后,個別克隆可用ELISA來分析或進行額外的淘選過程。然而,必須注意到成功的展示要求pⅥ融合蛋白定位在外周胞質上,正確地折疊并組合成完整的噬菌體顆粒。這樣的話,如果表達pⅥ融合蛋白的結合者干擾了選擇過程,那么將會稀釋“非干擾”結合者的濃度。
 

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 国产毛片久久国产 | 国内精品视频九九九九 | 日韩免费在线观看视频 | 免费黄色一级 | 久久精品国产波多野结衣 | 国产日韩欧美视频在线观看 | 激情五月激情综合 | 国产一区二区三区免费 | 国产精品青草久久 | 亚洲天堂精品在线观看 | 一区二区三区四区在线观看视频 | 亚洲欧美日韩在线播放 | 国产成人综合久久 | 天天插天天射天天操 | 亚洲日本va中文字幕线 | 天天色操 | tk中国丝袜丨vk | 99综合网| 色久视频 | 中文字幕2019年中文字幕 | 免费人成在线观看网站视频 | 色噜噜色噜噜天天拍一拍 | 三级黄色a| 98bb国产精品视频 | 亚洲欧美性视频 | 天天操天天舔天天干 | 国产精品天天干 | 中国二级毛片 | 在线韩国伦理片 | 亚洲成人中文 | 成人免费观看视频高清视频 | 免费人成在线观看视频色 | 欧美一级片在线免费观看 | haose08永久免费视频 | 国产精品久久久久久久人热 | 一区二区三区四区视频在线观看 | 全网免费在线播放视频入口 | 一个人看的视频www在线 | 亚洲色五月| 秋霞午夜鲁丝片午夜精品久 | h视频在线看 |