日韩毛片在线视频-日韩毛片在线影视-日韩美aaa特级毛片-日韩美a一级毛片-久久夜夜操妹子-久久夜夜肉肉热热日日

上海金穗生物科技有限公司
免費會員

在固相抗原上選擇噬菌體抗體

時間:2012-12-25閱讀:262
分享:

1.用溶于PBS的2m1抗原(10—1000ug/m1) 包被免疫管,室溫過夜。碳酸鹽緩沖液也可使用。
2.用PBS洗滌試管3次,并用2%MPBS封閉非特異性結合位點,放在旋轉的轉臺上,37℃l小時。
3.用PBS洗滌試管3次;加入lml滴度為10lz~1013的噬菌體抗體(稀釋于lml 4%MPBS中),在旋轉的轉臺上孵育30分鐘,再靜止1.5小時。
4.用PBS/PBS/Tween洗滌試管1次,并用PBS洗滌2次。每次洗滌是將緩沖液倒入和倒出試管。
5.加入1.Oml 100mmol/L三乙基胺,給試管加蓋,然后再轉臺上轉動8分鐘。
6.將洗脫液轉移至1個新試管中,并立即加入0.5mllmol/LTris—HCl(pH 7.4) 中和并混勻。
7.將一半體積的洗脫液(0.75m1)加入到10m1對數生長的大腸桿菌TGl或DH5αF,(A600值為0.5)中;37℃孵育培養液30分鐘,不用振蕩。
8.取1P1培養液在100mmTYE/amp/glu平板上鋪板以滴定洗脫的噬菌體。
9.以4000r/minl5分鐘離心剩余的培養液。重懸于0.5ml 2XTY培養基中,并在兩塊150mmTYE/amp/glu平板上鋪板。
10.準備下一輪選擇所需的噬菌粒顆粒:感染輔助噬菌體,但要將起始培養體積降至10m1(步驟1),并擴充培養體積至50ml。由于體積變小,可用臺式離心機操作。將噬茵體重懸于終體積為1.Oml的PBS中,并用大腸桿菌TGl測定噬菌體滴度。
11.從步驟1開始,重復進行選擇,共2~4輪。*輪過后,要增加洗滌的嚴謹性:洗脫前,用PBS/Tween洗滌20次并用PBS洗滌20;hQ。用PBS和PBS/Tween進行一次或兩次時間為30分鐘的洗滌步驟,也能提高嚴謹性。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 国产 欧美 日产久久 | 中文字幕亚洲第一 | 国产精品综合色区在线观看 | 国外成人在线视频网站 | 老司机成人午夜精品福利视频 | 亚洲视频大全 | 天天插天天 | 亚洲人成在线免费观看 | 岛国二区三区 | 农村寡妇一级毛片免费播放 | 97国产在线视频 | 日本三级3本三级带黄 | 国产一区二区自拍视频 | 啪啪免费网站入口链接 | 黄色在线 | 亚洲欧美日韩在线不卡 | 亚洲伊人成综合网 | 成人羞羞视频 | 亚洲欧美国产精品第1页 | www.日韩在线 | 日韩欧美亚洲国产一区二区三区 | 亚洲mv在线观看 | a级成人毛片久久 | 亚洲 国产 日韩 欧美 | 久久综合欧美成人 | 伦伦影院精品一区 | 天堂网www中文天堂在线 | 久久狠狠色噜噜狠狠狠狠97 | 国产成人综合91精品 | 日韩国产欧美精品综合二区 | 制服丝袜综合第八页 | 亚洲国产精品热久久2022 | 免费三级网站 | 中文毛片无遮挡高清免费 | 中文字幕一区在线 | 欧美在线导航 | 一本到在线 | 国产成人女人在线视频观看 | 黄网在线观看免费 | 欧美色伊人 | 中国男女全黄大片一级 |