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非洲豬瘟檢測(cè)儀器清單的操作流程有哪些關(guān)鍵步驟?

閱讀:111      發(fā)布時(shí)間:2025-6-20
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  樣本采集

  根據(jù)檢測(cè)目的選擇合適的樣本類型,如血液、組織、唾液、鼻腔拭子等。采集血液時(shí),一般選擇前腔靜脈或耳靜脈,使用一次性無(wú)菌注射器抽取適量血液,注入含有抗凝劑的采血管中,輕輕顛倒混勻,防止血液凝固。采集組織樣本時(shí),選取病變明顯的部位,如淋巴結(jié)、脾臟等,用無(wú)菌器械切取適量組織,放入無(wú)菌容器中。采集唾液和鼻腔拭子時(shí),使用專用的采樣拭子,在豬口腔或鼻腔內(nèi)輕輕旋轉(zhuǎn)擦拭,然后將拭子放入保存液中。

  樣本處理

  對(duì)于核酸檢測(cè),需對(duì)樣本進(jìn)行核酸提取。將采集的樣本按照核酸提取試劑盒的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,通常包括樣本裂解、核酸結(jié)合、洗滌和洗脫等步驟。例如,將血液樣本離心,取上清液加入裂解液中,充分混勻后進(jìn)行高溫裂解,然后加入磁珠結(jié)合核酸,經(jīng)過(guò)多次洗滌去除雜質(zhì),最后用洗脫液將核酸洗脫下來(lái)。對(duì)于抗原檢測(cè),一般需要對(duì)樣本進(jìn)行適當(dāng)稀釋,以減少樣本中雜質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾。

  儀器準(zhǔn)備與調(diào)試

  儀器安裝

  按照儀器說(shuō)明書(shū)的要求,將非洲豬瘟檢測(cè)儀器放置在平穩(wěn)、干燥、通風(fēng)良好的工作臺(tái)上,連接好電源線和數(shù)據(jù)線。確保儀器周圍有足夠的空間,便于操作和維護(hù)。

  儀器調(diào)試

  打開(kāi)儀器電源,進(jìn)行預(yù)熱和自檢。根據(jù)儀器提示,進(jìn)行參數(shù)設(shè)置,如檢測(cè)模式、檢測(cè)通道、反應(yīng)溫度和時(shí)間等。例如,在核酸檢測(cè)儀器中,設(shè)置PCR反應(yīng)的溫度循環(huán)參數(shù),包括變性溫度、退火溫度和延伸溫度以及各階段的時(shí)間。對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn),使用標(biāo)準(zhǔn)品或質(zhì)控品進(jìn)行檢測(cè),確保儀器的檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

  試劑準(zhǔn)備與加樣

  試劑準(zhǔn)備

  檢查試劑的有效期、外觀和保存條件。按照試劑說(shuō)明書(shū)的要求,將試劑從冰箱中取出,放置至室溫平衡。將檢測(cè)試劑從試劑瓶中取出,按照規(guī)定的比例進(jìn)行稀釋或混合。例如,將酶標(biāo)試劑與稀釋液按照一定比例混合,充分混勻后備用。

  加樣操作

  使用移液器準(zhǔn)確吸取樣本和試劑,加入到檢測(cè)板或反應(yīng)管中。加樣時(shí)要注意避免產(chǎn)生氣泡,確保加樣量準(zhǔn)確。例如,在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)中,將處理好的樣本和陰性、陽(yáng)性對(duì)照品分別加入到酶標(biāo)板的孔中,每孔加入量一般為100μL。加樣完成后,輕輕晃動(dòng)檢測(cè)板或反應(yīng)管,使樣本和試劑充分混合。

  檢測(cè)過(guò)程與監(jiān)控

  啟動(dòng)檢測(cè)

  將加好樣的檢測(cè)板或反應(yīng)管放入檢測(cè)儀器中,關(guān)閉儀器門,啟動(dòng)檢測(cè)程序。儀器會(huì)自動(dòng)按照設(shè)定的參數(shù)進(jìn)行檢測(cè),如PCR擴(kuò)增、抗原抗體反應(yīng)等。

  實(shí)時(shí)監(jiān)控

  在檢測(cè)過(guò)程中,密切關(guān)注儀器的運(yùn)行狀態(tài)和檢測(cè)數(shù)據(jù)。如發(fā)現(xiàn)儀器出現(xiàn)異常情況,如溫度異常、噪音過(guò)大等,應(yīng)立即停止檢測(cè),排查故障原因。對(duì)于一些需要實(shí)時(shí)觀察的檢測(cè)項(xiàng)目,如熒光定量PCR檢測(cè),可以通過(guò)儀器顯示屏觀察擴(kuò)增曲線,判斷檢測(cè)是否正常進(jìn)行。

  結(jié)果判讀與記錄

  結(jié)果判讀

  檢測(cè)完成后,儀器會(huì)自動(dòng)生成檢測(cè)結(jié)果。根據(jù)檢測(cè)方法和試劑說(shuō)明書(shū)的要求,對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行判讀。例如,在核酸檢測(cè)中,根據(jù)Ct值(循環(huán)閾值)判斷樣本是否為陽(yáng)性,一般Ct值小于規(guī)定閾值的樣本為陽(yáng)性;在抗原檢測(cè)中,根據(jù)顯色反應(yīng)判斷結(jié)果,出現(xiàn)明顯顯色的樣本為陽(yáng)性。對(duì)于一些可疑結(jié)果,應(yīng)進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)或采用其他檢測(cè)方法進(jìn)行驗(yàn)證。

  結(jié)果記錄

  將檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確記錄在檢測(cè)記錄表中,包括樣本編號(hào)、檢測(cè)時(shí)間、檢測(cè)方法、檢測(cè)結(jié)果等信息。同時(shí),對(duì)檢測(cè)過(guò)程中出現(xiàn)的異常情況進(jìn)行詳細(xì)記錄,以便后續(xù)分析和追溯。


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