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3T3誘導(dǎo)分化試劑盒

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更新時間:2023-06-20 09:13:01瀏覽次數(shù):113次

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經(jīng)營模式:經(jīng)銷商

商鋪產(chǎn)品:842條

所在地區(qū):江蘇蘇州市

聯(lián)系人:耿少華 (經(jīng)理)

產(chǎn)品簡介

3T3誘導(dǎo)分化試劑盒產(chǎn)品性能穩(wěn)定,可提高小鼠細(xì)胞成骨誘導(dǎo)效率;

詳細(xì)介紹

3T3誘導(dǎo)分化試劑盒

3T3誘導(dǎo)分化試劑盒 產(chǎn)品性能穩(wěn)定,可提高小鼠細(xì)胞成骨誘導(dǎo)效率;

3t3成骨誘導(dǎo)分化試劑盒3T3誘導(dǎo)分化

體細(xì)胞成脂誘導(dǎo)分化

 3T3誘導(dǎo)分化試劑盒使用說明 

1. 成脂誘導(dǎo)分化操作

 1.1 接種干細(xì)胞 取對數(shù)生長期的細(xì)胞, 按 照 2.0×10e4 cells/cm2 的細(xì)胞密度接種至培養(yǎng)器皿,于 37℃, 5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)至匯合度 90~99%,棄掉 上清,加入成脂誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基誘導(dǎo)液。 

NOTE:如細(xì)胞貼壁性較差,建議使用 0.1%明膠對培養(yǎng)底 面進(jìn)行包被。

1.2 細(xì)胞分化誘導(dǎo) 于 37℃,5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)約 3 天,更 換為成脂誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基維持液,培養(yǎng) 1 天后, 再更換為成脂誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基誘導(dǎo)液,繼續(xù)培養(yǎng) 3 天。 按照以上換液頻率誘導(dǎo) 14~21 天,并注意觀 察細(xì)胞形態(tài)變化。根據(jù)細(xì)胞誘導(dǎo)形成的脂滴數(shù)量 和大小,決定終止細(xì)胞誘導(dǎo)的時間,并進(jìn)行染色 鑒定。

 2. 染色鑒定

 2.1 細(xì)胞固定 吸去培養(yǎng)基使用適量 1×PBS 清洗一次,棄去 后取適量 4%中性覆蓋培養(yǎng)器皿底面,室 溫固定 30~60 min,棄去固定液再使用 1×PBS 清 洗兩次。 

2.2 油紅 O 染色 取生理鹽水或1×PBS與油紅O原液配制油紅 O工作液(油紅O原液: 生理鹽水=3:2),現(xiàn)用現(xiàn) 配。配制后可對油紅O工作液進(jìn)行離心,以沉淀 染色液中的過飽和析出物。向清洗干凈的誘導(dǎo)孔 內(nèi)加入適量油紅O工作液,靜置染色30min。吸走 油紅O工作液,用1×PBS清洗兩次,并加入適量1 ×PBS避免細(xì)胞干燥。

 2.3 誘導(dǎo)評估

 顯微鏡下觀察成脂染色效果,并進(jìn)行圖像采 集和誘導(dǎo)評估。誘導(dǎo)成功時,脂滴與油紅 O 染料 結(jié)合后呈現(xiàn)紅色或橘紅色。 NOTE: 干細(xì)胞的成脂分化水平因細(xì)胞類型、細(xì)胞供體來 源,培養(yǎng)條件、細(xì)胞代次、細(xì)胞狀態(tài)和分化時間等因素而異。

成脂干細(xì)胞分化


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