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技術文章

外泌體的提取方法盤點

閱讀:20發布時間:2024-12-1

 獲得高純度的外泌體是開展后續研究的基礎。目前分離外泌體的方式有許多種,如:

1.色譜法

2.超濾法

3.多聚物沉淀法

4.磁珠免疫法等

 

        但超速離心法仍舊是業內推崇的外泌體分離金標準,這是因為超速離心法可以準確地重復獲取外泌體,同時較大限度減少蛋白質聚集體和雜質離子的共純化現象。如果選擇超速離心法,那么可以依托日立離心機,來獲取更高純度的外泌體。

 

        基于超速離心法的CP100NX 外泌體分離方案,依托于超速離心機的外泌體分離方案大致有兩種:分別是差速離心法和密度梯度離心法。

 

        其中密度梯度離心法可以成功地將亞細胞成分(例如過氧化物酶體,線粒體等)分離到密度梯度溶液中的不同層中。外泌體粗提樣品被放置在梯度液頂部,當施加離心力時,樣品中的顆粒以特定的速率通過梯度,該梯度以從上到下的密度增加。

 

        樣品中的外泌體將在 1.15-1.19 g/ml 的密度范圍富集,隨后可以通過分餾收集。密度梯度超速離心對從蛋白質聚集體和非膜顆粒中分離出外泌體非常有效。在日常分離中,兩種離心方法可以搭配使用,會有助于獲取更高純度的外泌體。

 


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