【儀表網(wǎng) 研發(fā)快訊】近日，中國(guó)科學(xué)院合肥物質(zhì)院安光所劉勇研究員、朱靈研究員團(tuán)隊(duì)在法醫(yī)微量物證DNA高效富集方面取得新進(jìn)展，相關(guān)研究成果發(fā)表在法醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中科院一區(qū)TOP期刊《國(guó)際法醫(yī)科學(xué)：遺傳學(xué)》上。
 

　　法醫(yī)物證 DNA 又被稱(chēng)為“新一代物證之王”。然而，隨著犯罪嫌疑人反偵察能力的提高，遺留在案犯現(xiàn)場(chǎng)的物證DNA十分有限，且含有大量抑制物，如何從微量物證檢材中提取到足夠多的 DNA 用于遺傳標(biāo)記物分型鑒定，一直是法醫(yī)物證 DNA 分析檢驗(yàn)的難點(diǎn)。
 

　　針對(duì)這一問(wèn)題，團(tuán)隊(duì)提出基于“電荷吸附”原理的微量DNA高效富集新方法，使用1%濃度的殼聚糖修飾50nm磁性顆粒，在酸性條件下，通過(guò)靜電作用吸附帶負(fù)電荷的DNA。為模擬實(shí)際案件現(xiàn)場(chǎng)，團(tuán)隊(duì)制備了含有腐殖酸、色素、鐵繡以及以上三種物質(zhì)共存的實(shí)驗(yàn)樣品，將人支氣管上皮細(xì)胞與上述樣品混合，并使用400 μL裂解緩沖液、20 μL蛋白酶K(10 mg/mL)和20 μL殼聚糖磁性珠溶液(20 mg/mL)進(jìn)行細(xì)胞裂解和DNA富集。研究結(jié)果表明，殼聚糖磁性珠的提取靈敏度為10個(gè)細(xì)胞以下量級(jí)，優(yōu)于現(xiàn)有方法，且殼聚糖磁珠提取的DNA無(wú)需洗脫，可直接進(jìn)行“原位PCR擴(kuò)增”。該方法提取的DNA樣品 STR位點(diǎn)的檢出率達(dá)到97.9%，高于現(xiàn)有同類(lèi)方法(66.7%)。該方法的優(yōu)勢(shì)不僅在于DNA的高效富集，而且通過(guò)靜電吸附的方式避免了傳統(tǒng)方法可能導(dǎo)致的DNA斷裂，提高了STR位點(diǎn)檢出率。該成果在法醫(yī)物證 DNA 鑒定，祖源分析、烈士遺骸鑒定、重大災(zāi)難遇難者身份確認(rèn)等領(lǐng)域具有廣闊應(yīng)用前景。
 

　　碩士研究生胡安中為論文第一作者，朱燦燦副研究員為通訊作者。該項(xiàng)研究工作得到了國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃、國(guó)家自然科學(xué)基金，安徽省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃等項(xiàng)目支持。
 

殼聚糖納米磁珠吸附原理及過(guò)程
 

殼聚糖納米磁珠與傳統(tǒng)方法DNA提取性能對(duì)比