CellKeyTM 無(wú)標(biāo)記、實(shí)時(shí)、高通量
生理狀態(tài)細(xì)胞分析系統(tǒng)
體 驗(yàn) 藥 物 篩 選 的 新 方 法 、 新 理 念
從現(xiàn)在開始
從現(xiàn)在開始 一種方法，多種應(yīng)用
CellKeyTM平臺(tái)的一系列應(yīng)用模式為生理狀態(tài)下的生命活動(dòng)提供更、更快、更明智的解決方案。該方法實(shí)施簡(jiǎn)便，能夠在所有貼壁或不貼壁細(xì)胞株以及原代培養(yǎng)細(xì)胞上對(duì)受體進(jìn)行復(fù)雜的研究。
受體淘洗
CellKeyTM是一種創(chuàng)新且易于使用的技術(shù)。通過向細(xì)胞加入一系列已知受體的激動(dòng)劑，使用相同的實(shí)驗(yàn)方案，可同時(shí)分析該細(xì)胞上G蛋白偶聯(lián)受體(GPCRs)和激酶受體(TKRs)的功能狀況。CellkeyTM系統(tǒng)配備96道或384道移液裝置。
對(duì)于任何特定的細(xì)胞株，可制定其內(nèi)源性的、功能活躍的受體的目錄。
在一組細(xì)胞系上，篩選比較某一特定受體靶點(diǎn)的功能活動(dòng)狀態(tài)。
選擇的生理狀態(tài)下的生命活動(dòng)相關(guān)靶點(diǎn)作二次篩選。
信號(hào)通路的鑒別
CellKeyTM是一個(gè)用于監(jiān)測(cè)不同家族的已知受體和未知的孤兒受體活動(dòng)狀態(tài)的通用平臺(tái)，并能進(jìn)一步檢測(cè)受體激活后的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。
CellkeyTM系統(tǒng)上檢測(cè)到的特征性阻抗的反應(yīng)方式對(duì)應(yīng)于不同的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活。
阻抗的特定變化形式代表著特定的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。
檢測(cè)先導(dǎo)化合物的作用機(jī)制。
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的解析
CellKeyTM系統(tǒng)可用于破解受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，捕獲先導(dǎo)化合物詳細(xì)的作用機(jī)制。
檢測(cè)分析受體激活后誘導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)下游事件。
檢測(cè)一系列信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的調(diào)節(jié)劑對(duì)CellkeyTM系統(tǒng)特征性阻抗反應(yīng)的影響作用。
先導(dǎo)化合物鑒定和藥理學(xué)剖析
CellKeyTM系統(tǒng)，一個(gè)單一的平臺(tái)，卻可對(duì)所有細(xì)胞系及受體作藥理學(xué)評(píng)價(jià)、檢測(cè)。且這一過程與受體激活后的細(xì)胞內(nèi)過程無(wú)關(guān)。
進(jìn)一步確認(rèn)初級(jí)篩選產(chǎn)生的先導(dǎo)化和物，不依賴于受體的靶點(diǎn)類型。
確定激動(dòng)劑和拮抗劑的效力和效能。
分析數(shù)據(jù)，以提供受體拮抗劑受體的選擇性分析和Schild分析。
從現(xiàn)在開始 全新的無(wú)標(biāo)記技術(shù)用于所有的細(xì)胞水平實(shí)驗(yàn)
當(dāng)受體受到刺激后，通過信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)級(jí)聯(lián)的反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生一系列的功能變化，包括：
細(xì)胞的貼附能力
細(xì)胞的形態(tài)和體積
細(xì)胞與細(xì)胞之間的相互作用
CellKeyTM系統(tǒng)的核心技術(shù)是對(duì)細(xì)胞進(jìn)行雙電極介電譜(CDS)掃描，測(cè)量細(xì)胞間和跨細(xì)胞電阻，是一種非侵入性的，無(wú)標(biāo)記的測(cè)量方法。
將表達(dá)目標(biāo)受體的細(xì)胞種植在CellKeyTM系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)96孔板內(nèi)。這種微孔板的底部安裝有電極。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中，通過這些電極向細(xì)胞施加小的電壓脈沖。低頻率脈沖誘導(dǎo)的細(xì)胞外電壓電流(IEC)會(huì)繞過的電極上細(xì)胞，而高頻率脈沖誘導(dǎo)的電流則會(huì)穿過細(xì)胞，形成跨細(xì)胞電流(ITC)。CellKeyTM系統(tǒng)可測(cè)量這些電流，并根據(jù)歐姆定律，換算成電阻值，呈現(xiàn)出來(lái)。
從現(xiàn)在開始 簡(jiǎn)化、加速藥物篩選的進(jìn)程
CellKeyTM 系統(tǒng)是一種無(wú)標(biāo)記、通用、檢測(cè)活細(xì)胞功能的新技術(shù)。
可在活細(xì)胞上實(shí)時(shí)檢測(cè)受體的功能活動(dòng)。內(nèi)源性受體和轉(zhuǎn)染的受體均可使用
主要特點(diǎn)：
真正的生理狀態(tài)下生命活動(dòng)檢測(cè)
可靠、穩(wěn)定的檢測(cè)內(nèi)源性受體。
免標(biāo)記，方法優(yōu)化
不需要任何標(biāo)記，如tag，染料和特殊的試劑。
無(wú)需基因工程改造細(xì)胞，如雜合G蛋白，arrestins，報(bào)告基因結(jié)構(gòu)等等。
的動(dòng)力學(xué)響應(yīng)數(shù)據(jù)
響應(yīng)形式與受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路相關(guān)。
通用
一種方法檢測(cè)所有G蛋白偶聯(lián)受體(GPCRs)和激酶受體(TKRs)。
操作簡(jiǎn)單
的開啟即用的系統(tǒng)，既直觀又靈活。
實(shí)時(shí)觀測(cè)，方便快捷
采用實(shí)時(shí)動(dòng)力學(xué)檢測(cè)模式，15分鐘可取得實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
配備96道或384道移液系統(tǒng)
加藥、檢測(cè)同時(shí)進(jìn)行，不會(huì)丟失實(shí)驗(yàn)信息。
CellKeyTM系統(tǒng)技術(shù)參數(shù)
CellKeyTM系統(tǒng)包括 專有的阻抗測(cè)量系統(tǒng)，96道或384道集成移液系統(tǒng)，環(huán)境控制，數(shù)據(jù)采集和分析軟件。
| Cellkey 96 | Cellkey 384 | |
| 測(cè)量原理 | 電阻值 | 電阻值 |
| 測(cè)量頻率 | 1kHz- 10kHz | 1kHz- 10kHz |
| 方法類型 | 均相，以細(xì)胞為基礎(chǔ) | 均相，以細(xì)胞為基礎(chǔ) |
| 檢測(cè)模式 移液和讀數(shù)同時(shí)進(jìn)行 | 終點(diǎn)法或動(dòng)力學(xué)法測(cè)量 | 終點(diǎn)法或動(dòng)力學(xué)法測(cè)量 |
| 數(shù)據(jù)更新速度 | 2秒或10秒 | 4秒或20秒 |
| 微孔板規(guī)格 | 96孔Sciex專用細(xì)胞板 | 384孔Sciex專用細(xì)胞板 |
| 化合物板規(guī)格 | 96或384孔化合物板和存儲(chǔ)器 | 384孔化合物板和存儲(chǔ)器 |
| 移液系統(tǒng) | ||
| 規(guī)格 | 96道移液頭 | 384道移液頭 |
| 分液速度 | 可調(diào) | 可調(diào) |
| 分液高度 | 可調(diào) | 可調(diào) |
| 化合物混合 | 能 | 能 |
| 分液體積 | 0-200微升 | 0.5-25微升 |
| 槍頭能否洗滌 | 能 | 能 |
| 溫度范圍 分析范圍 環(huán)境范圍 | 室溫上5℃ - 37℃ 15-30℃ | 15-30℃ |
| 物理參數(shù) 臺(tái)式 體積 重量 | 是 HxWxD =700mm x850mm x580mm / 28in x33in x23in 128kg/282lbs | HxWxD =700mmx1000mmx580mm / 28in x39in x23in 145kg/320lbs |
| 操作臺(tái)空間 讀數(shù)位置 化合物板位置 槍頭位置 | 4 1 2 1 | 4 1 2 1 |
| 電源要求 功率 電壓和頻率 | 630W 100-120 / 200-240V (用戶可調(diào)) 50 / 60 Hz | 700W 100-120 / 200-240V (用戶可調(diào)) 50 / 60 Hz |
| 電腦 處理器 LCD顯示器尺寸 | 包含 雙核，2.66 GHz, 2GB RAM 19-Inch | 包含 雙核，2.66 GHz, 2GB RAM 19-Inch |
