原代兔支氣管成纖維細(xì)胞
培養(yǎng)信息：包被條件
培養(yǎng)基含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液：0.25%YI蛋白酶兔支氣管成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
兔支氣管成纖維細(xì)胞分離自支氣管組織；支氣管（Bronchi），是指由氣管分出的各級分枝，由氣管分出的一級支氣管，即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較，前者較細(xì)長，走向傾斜；后者較粗短，走向較前者略直，所以經(jīng)氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是，氣管是以“C”型的氣管軟骨為支架，而支氣管不是。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的支氣管成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。支氣管成纖維細(xì)胞在生理條件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài)，合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。 |
方法簡介：
實驗室分離的兔支氣管成纖維細(xì)胞采用膠原酶-YI酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的兔支氣管成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
英文名稱 | Rabbit Bronchial Fibroblast Cells | 組織來源 | 支氣管組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
生長特性 | 貼壁 | 貨號 | GOY-01X1513 |
1. 取材的組織要盡快培養(yǎng)。如若不能及時培養(yǎng)，可將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi)，放置于冰浴或4℃冰箱中，如果組織塊很大，應(yīng)切成1cm3以下的小塊再低溫保存，但時間不能超過24h。
2. 從消化道、周圍有壞死組織等污染因素存在的區(qū)域取材，可用含500～1000u/ml的青BSS液漂洗5～10min，或用10%注射液沖洗浸泡10min再作培養(yǎng)。
3. 組織塊不易貼壁，可預(yù)先在瓶壁涂薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。
4. 原代培養(yǎng)的1～2d內(nèi)要特別注意觀察是否有細(xì)菌、真菌、霉菌的污染，一旦發(fā)現(xiàn)，要及時清除。
1. 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶（或皿）中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
2. 消化培養(yǎng)法
組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和 非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團(tuán)塊膨松，由塊狀 變成 絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠 瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。
3. 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
4. 器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
大鼠乳腺上皮細(xì)胞 | 大鼠乳腺成纖維細(xì)胞 |
大鼠卵巢內(nèi)膜細(xì)胞 | 轉(zhuǎn)基因大豆MON87705品系檢測試劑盒(熒光PCR法) |
大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞 | 轉(zhuǎn)基因大豆MON87708品系檢測試劑盒(熒光PCR法) |
大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞 | 轉(zhuǎn)基因水稻TT51-1(BT63)基因檢測試劑盒(熒光PCR法) |
大鼠子宮成纖維細(xì)胞 | 轉(zhuǎn)基因大豆EPSPS基因檢測試劑盒(熒光PCR法) |
大鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞 | 轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE62檢測試劑盒(熒光PCR法) |
大鼠卵泡膜細(xì)胞 | 轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE601檢測試劑盒(熒光PCR法) |
雜交瘤細(xì)胞；D9 | 轉(zhuǎn)基因植物PAT基因檢測試劑盒(熒光PCR法) |
大鼠宮頸上皮細(xì)胞 | 轉(zhuǎn)基因植物NOS終止子檢測試劑盒(熒光PCR法) |
大鼠子宮內(nèi)膜干細(xì)胞 | 轉(zhuǎn)基因植物CamV35S啟動子檢測試劑盒(熒光PCR法) |
大鼠附睪上皮細(xì)胞 | 魚源性成分(Fish)檢測試劑盒(熒光PCR法) |
大鼠子宮微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 鴨源性成分Cytb基因(Duck-Cytb)檢測試劑盒(熒光PCR法) |
大鼠乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 | 原代兔支氣管成纖維細(xì)胞鴨源性成分Co1基因(Duck-Co1)檢測試劑盒(熒光PCR法) |
大鼠陰道真皮成纖維細(xì)胞 | 火雞源性成分 (Turkey)檢測試劑盒（熒光PCR法） |
衣原體通用型(CP)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 鯊魚源性成分（Shark）檢測試劑盒(熒光PCR法) |
