NAD激酶（NADK）可見分光光度法檢測(cè)試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品：兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISA Kit，48T/96T
人Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA Kit，48T/96T
人內(nèi)臟脂肪特異性蛋白抑制劑(vaspin)
小鼠內(nèi)臟脂肪特異性蛋白抑制劑(vaspin)
大鼠內(nèi)臟脂肪特異性蛋白抑制劑(vaspin)
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/24樣 |
檢測(cè)方法 | 可見分光光度法 |
貨號(hào) | GOY-01S6324 |
商品介紹：
測(cè)定意義
NADK（EC 2.7.1.23）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是目前所發(fā)現(xiàn)的生物體內(nèi)惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶，可催化NAD(H)以ATP或無(wú)機(jī)多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進(jìn)行磷酸化反應(yīng)，生成NADP(H)。因此，NAD激酶在合成NADP(H)以及調(diào)節(jié)NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。
測(cè)定原理：
NADK催化NAD+磷酸化，生成NADP+；NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH；NADPH通過(guò)PMS的遞氫作用，還原氧化型噻唑藍(lán)（MTT），通過(guò)在600 nm下測(cè)定MTT的還原速度（吸光值的變化）可反映出NADK活性的大小。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制： 市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。 肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集： 全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
茜素綠 Dye content 95%(R)-1-Boc-3-羥基吡咯烷 98% Anti-Polyprotein (Hepatitis G Virus) 庚型肝炎病多聚蛋白抗體
燦爛綠 高純級(jí),95%2-(1-基)苯 97%Anti-ZEBRA 人類皰疹病4抗體
鉍試劑Ⅰ 97%喹唑啉 98%Anti-membrane glycoprotein E(VZV) 人水痘帶狀皰疹病gE蛋白抗體
鉍試劑II CP三氟磺酸鈧 98%Anti-HHV8/ORF K2 類皰疹病8抗體
鉍試劑II 98%四氫-2 2-二甲基-4H--4-酮 95%Anti-HHV8/ORF50 人類皰疹病8抗體
考馬斯亮藍(lán)G250 AR三(4-溴苯基) 98%Anti-HHV8/ORF50 人類皰疹病8抗體
考馬斯亮藍(lán)G250 AR，無(wú)蛋白2-甲酰基噻唑 97%Anti-HHV8/ORF50 人類皰疹病8抗體
考馬斯亮藍(lán)G250 70%，用于電泳500ml透氣不透液墊片 40mm口徑 配套42mm口徑蓋Anti-HHV8/ORF K2 人類皰疹病8抗體
NAD激酶（NADK）可見分光光度法檢測(cè)試劑盒
酵母DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
溶壁酶（破壁酶）干粉
蝸牛酶干粉
消解酶（溶細(xì)胞酶）干粉
真菌DNAout
柱式真菌DNAout
細(xì)胞器DNA提取
絲狀真菌線粒體DNAout
線狀DNA清除劑
柱式動(dòng)物線粒體DNAout，PCR級(jí)
柱式動(dòng)物線粒體DNAout，測(cè)序級(jí)
柱式昆蟲mtDNAout，測(cè)序級(jí)（停產(chǎn)）
柱式血液mtDNAout，測(cè)序級(jí)（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
柱式植物mtDNAout，測(cè)序級(jí)（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
柱式植物葉綠體DNAout
細(xì)菌DNA提取
Southern級(jí)細(xì)菌（G+）DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
Southern級(jí)細(xì)菌（G-）DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
百萬(wàn)堿基級(jí)細(xì)菌（G+）DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
百萬(wàn)堿基級(jí)細(xì)菌（G-）DNAout（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
大提柱式土壤DNAout
大提柱式細(xì)菌DNAout
