質譜分析實驗條件的選擇與操作方法！
質譜分析實驗條件的選擇與操作方法！
百歐博偉生物 質譜儀種類很多，不同類型的質譜儀的主要差別在于離子源。離子源的不同決定了對被測樣品的不同要求，同時所得到信息也不同。因此，在進行質譜分析前，要根據樣品狀況和分析要求選擇合適的質譜儀。除了純化合物的結構解析可使用直接進樣分析外．一般藥物分析目前均采用色譜一質譜聯用技術，主要是：氣相色譜一質譜聯用儀和液相色譜一質譜聯用儀，現就這兩類儀器的分析方法敘述如下：
1．分析條件的選擇
(1)GC—MS分析條件的選擇
在GC—MS分析中，色譜的分離和質譜數據的采集是同時進行的。為了使每個組分都得到分離和鑒定，必須選擇合適的色譜和質譜分析條件。
色譜條件包括色譜柱類型，固定液種類，汽化溫度，載氣流量，分流比，溫升程序等。質譜條件包括電離電壓，電子電流，掃描速度，質量范圍，溶劑去除時間等。這些都要根據樣品情況進行設定。
(2)LC—MS分析條件的選擇
Lc分析條件的選擇要考慮兩個因素：使分析樣品得到分離條件并得到電離條件。如果二者發生矛盾，則要尋求折中條件。LC可選擇的條件主要有流動相的組成和流速。在LC和MS聯用的情況下，由于要考慮噴霧霧化和電離，因此，有些溶劑不適合于作流動相。不適合的溶劑和緩沖液包括無機酸、不揮發的鹽(如磷酸鹽)和表面活性劑。不揮發性的鹽會在離子源內析出結晶，而表面活性劑會抑制其它化合物電離。在LC—MS分析中常用的溶劑和緩沖液有水、甲醇、甲酸、乙酸、氫氧化銨和
乙酸銨等。對于選定的溶劑體系，通過調整溶劑比例和流量以實現好的分離。值得注意的是對于LC分離的流量，往往超過電噴霧允許的流量，此時需要采取柱后分流，以達到好的霧化效果。
質譜條件的選擇主要是為了改善霧化和電離狀況，提高靈敏度。調節霧化氣流量和干燥氣流量可以達到霧化條件，改變噴嘴電壓和透鏡電壓等可以得到靈敏度。對于多級質譜儀，還要調節碰撞氣流量和碰撞電壓及多級質譜的掃描條件。
在進行LC—MS分析時，樣品可以利用旋轉六通閥通過LC進樣，也可以利用*直接進樣，樣品在電噴霧源或大氣壓化學電離源中被電離，經質譜掃描，由計算機可以采集到總離子色譜和質譜。
2．數據的采集
有機混合物經色譜柱分離后進人質譜儀離子源，在離子源被電離成離子。離子經質量分析器、檢測器之后即成為質譜儀信號，計算機采集到具有一定離子強度的質譜，并自動將每個質譜的所有離子強度相加，顯示出總離子強度，總離子強度隨時間變化的曲線就是總離子色譜圖，又稱總離子流色譜圖(total ion chromatogram，TIc)?？傠x子色譜圖的形狀和普通的色譜圖是相一致的。它可以認為是用質譜作為檢測器得到的色譜圖。
質譜儀掃描方式有兩種：全掃描和選擇離子掃描。全掃描是對質量范圍內的離子全部掃描并記錄，得到的是正常的質譜圖，這種質譜圖可以提供未知物的分子量和結構信息，并進行庫檢索。選擇離子監測(selec-t Ion monitoring，SIM)只對選定的離子進行檢測，而其它離子不被記錄，大優點：一是對離子進行選擇性檢測，只記錄特征的、感興趣的離子，不相關的干擾離子統統被排除；二是選定離子的檢測靈敏度大大提高。
由于選擇離子掃描只能檢測有限的幾個離子，不能得到完整的質譜圖，因此不能用來進行未知物定性分析。但是如果選定的離子有很好的特征性，也可以用來表示某種化合物的存在。選擇離子掃描方式主要的用途是定量分析，由于它的選擇性好，可以把由全掃描方式得到的非常復雜的總離子色譜圖變得十分簡單，消除其它組分造成的干擾。
需要指出的是，Lc—MS得到總離子色譜圖與由紫外檢測器得到的色譜圖可能不同。因為有些化合物沒有紫外吸收，用普通液相色譜分析不出峰，但用LC-MS分析時會出峰。由于電噴霧是一種軟電離源，通常很少或沒有砰片，譜圖中只有準分子離子，因而只能提供未知化合物的分子量信息，不能提供結構信息，很難用來做定性分析。
為了得到未知化合物的結構信息，可使用串聯質譜儀，將準分子離子通過碰撞活化得到其子離子譜，然后解釋子離子譜來推斷結構。如果只有單級質譜儀，也可以通過源內CID得到一些結構信息。
北京百歐博偉生物技術有限公司（biobw）是北京的一家專業于生物技術的研究與廣泛運用及推廣的高科技公司，位于北京企業林立的豐臺區造甲街，生物技術推廣及運用早于2011年開始，成立公司于2013年一月。本公司主要提供色譜耗材、色譜儀器、固相萃取裝置、化學試劑、樣品瓶、氘燈、標準品、微生物技術、菌種保藏服務以及ATCC產品代理等產品及服務。
