輔酶ⅡNADP(H)含量可見分光光度法檢測試劑盒公司正在出售的產品：人狀瘤病抗體(HPV) ELISA Kit，48T/96T
人狀瘤病抗體IgM(HPV-IgM)ELISA Kit，48T/96T
人狀瘤病抗體IgG(HPV-IgG)ELISA Kit，48T/96T
雞白血病病抗原(ALV-AG)ELISA Kit，48T/96T
人骨粘連蛋白(ON)ELISA Kit，48T/96T
商品屬性：
產品名稱 | |
規格 | 50管/24樣 |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
貨號 | GOY-01S6350 |
商品介紹：
測定意義
輔酶ⅡNADP(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，NADP+和NADPH含量測定可以計算NADP（NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值，其變化與磷酸戊糖途徑和生物合成以及抗氧化反應密切相關。NADPH/NADP+比值不僅是細胞氧化還原態的主要標志之一，而且在PPP途徑、生物合成和抗氧化代謝中具有重要調控作用。
測定原理
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NADP+和NADPH。NADPH通過PMS的遞氫作用，使氧化型噻唑藍（MTT）還原為甲瓚，570nm下檢測吸光值，從而測定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原NADP+為NADPH，從而檢測NADP+含量。
所需的儀器和用品
可見分光光度計、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
實驗方法學：
一、肝素的配制： 市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。 肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鐘轉動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集： 全血根據收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
蕈堿型乙酰受體（抗原）Anti-ARMCX1 Antibody陳皮炭Chen Pitan
C-肽（C肽）Anti-ARL2BP Antibody人工虎骨Artificial?bones
鈣結合蛋白（抗原）Anti-ARMCX2 Antibody白薇Bai Wei
腺苷受體A3抗原Anti-ARMCX3 Antibody全葉青蘭All Ye Qinglan
巨噬來源的趨化因子αV多肽Anti-ARNT2 Antibody土鱉蟲（冀地鱉）Woodlouse?（Hebei?Eupolyphaga sinensis）
化腺苷單活化蛋白激α1抗原Anti-ARPP21 Antibody紫草（新疆紫草）Gromwell?（Lithospermum?Xinjiang）
環腺苷酸應答元件結合蛋白（抗原）Anti-ARPP21 Antibody黃根Huang Gen
化環腺苷酸應答元件結合蛋白（多肽）Anti-ARRDC2 Antibody猴棗Hou Zao
輔酶ⅡNADP(H)含量可見分光光度法檢測試劑盒氟化鉻 AROAT-3(Organic anion transporter 3) 陰離子轉運蛋白-3(抗原)猴嗜環蛋白/親環素B(CYPB)聯免疫吸附測定試劑盒
氟化鎂 AR，97.5% galectin 9 半糖凝集素9（抗原）猴白介素12 p40(IL-12 p40)聯免疫吸附測定試劑盒
氟鋅 CPOct-4 胚胎干關鍵蛋白(多肽)猴載脂蛋白A2(ApoA2)聯免疫吸附測定試劑盒
氟化鋅,無水 AR,99%OPN(osteopontin) 骨橋蛋白（抗原）猴β干擾素(IFN-β)聯免疫吸附測定試劑盒
氟化鋅,四水 98%P16/CDKN2A (Cyclin-dependent kinase inhibitor-2A) 抑癌因p16（抗原）猴DNA結合蛋白(DBP)聯免疫吸附測定試劑盒
并咪唑 AR,98.5%p21/WAF1/CIP1 p21 核分裂抑制因子之一（抗原）猴核糖核T2(RNASET2)聯免疫吸附測定試劑盒
2-巰吡-1-氧化鈉鹽 96%p27 (cyclin-dependent kinase inhibitor 1B) p27(抗原)猴軟骨寡聚質蛋白(COMP)聯免疫吸附測定試劑盒
2-巰吡-1-氧化鈉鹽 40%水溶液P63 protein P63 腫瘤抑制因（抗原）猴絨毛蛋白(CVL/EZR)聯免疫吸附測定試劑盒
角鯊烷 99%OPG(Osteoprotegerin) 護骨素(多肽抗原)猴破骨相關受體(OSCAR)聯免疫吸附測定試劑盒
N-乙-2-氨吡咯烷 98%OPGL (Osteoprotegerin ligand) 骨保護蛋白配體(抗原)猴半凝集素14(GAL14)聯免疫吸附測定試劑盒
1-(2-二氨乙)-1H-5-巰-四氮唑 98%P311 protein 增生性瘢痕相關蛋白（抗原）猴過氧化物體增殖物激活受體α(PPAR-α)聯免疫吸附測定試劑盒
1-乙-2-吡咯烷酮 99%PARP(poly ADP-ribose polymerase) 多腺苷二多聚抗原猴T急性淋巴母白血病相關抗原(TALLA-1/CD231)聯免疫吸附測定試劑盒
5-四唑 98%Visfatin-1 (PBEF1)(NT) Human 內脂素/內臟脂肪素（人：N端多肽）、內臟脂肪素、 又稱：前B克隆增強因子、內肥素、腹脂素猴腸三葉肽因子3(TFF3)聯免疫吸附測定試劑盒
2-氧-5-磺酰酯 98%Visfatin-1 (PBEF1)(NT) hu、 mo、 rat、MK 內脂素/內臟脂肪素（人、大、小鼠、猴同源：N端多肽）、內臟脂肪素、前B克隆增強因子、內肥素、腹脂素猴八聚體結合轉錄因子2(OBTF2)聯免疫吸附測定試劑盒
疊氮鈉 AR,99%（劇品）Visfatin-2(CT)hu、mo、rat、MK 內脂素/內臟脂肪素（抗人、大、小鼠、猴：N端多肽）前B克隆增強因子、內肥素、腹脂素猴纖維連接素相關抗原(FRA)聯免疫吸附測定試劑盒
操作步驟:
實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。
4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。
