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產品名稱:MDHAR單脫氫抗壞血酸還原酶微量法
規格:100管/96樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63232
商品介紹:
測定意義 MDHAR催化MDHA還原生成AsA,在抗壞血酸氧化還原代謝中具有重要作用。 測定原理: MDHAR 催化 NADH 還原MDHA 生成 AsA和NAD+,NADH在340 nm有特征吸收峰,但是NAD+沒有。通過測定340 nm光吸收下降速率,來計算出MDHAR活性。 實驗中所需儀器及設備: 研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液槍和雙蒸水 |
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。 1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。 8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。 |
粗酶液提取:
1、細胞或組織樣品的制備: 培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
豬去精加壓(dDAVP)試劑盒 Human Appbp2(Amyloid protein-binding protein 2) ELISA Kit胚胎干相關蛋白FOPNL抗體
豬衰變加速因子(DAF)試劑盒 Human ANAPC2 (Anaphase-promoting complex subunit 2) ELISA KIT磷化癌基因FOS蛋白B抗體
豬芳基硫酯A(ARSA)試劑盒 Human ANK1(Ankyrin-1) ELISA Kit叉頭蛋白D2抗體
豬趨化因子CX3C受體1(CX3XR1)試劑盒Human ANLN (Actin-binding protein anillin) ELISA KIT叉頭蛋白E3抗體
豬鳥苷激1(GUK1)試劑盒 Human ANKFY1 (Rabankyrin-5) ELISA KIT叉頭蛋白F2抗體
豬脂肪分化相關蛋白(ADRP)試劑盒 Human Appbp2(Amyloid protein-binding protein 2) ELISA Kit叉頭蛋白H1抗體
豬熱休克蛋白27(HSP-27/HSPB1)試劑盒 Human ANAPC2 (Anaphase-promoting complex subunit 2) ELISA KIT叉頭蛋白I1抗體
豬磷肌-3-激2α肽(PI3K2α)試劑盒Human AIF1L (Allograft inflammatory factor 1-like) ELISA KIT磷化叉頭蛋白4抗體
豬甲狀旁腺受體2(PTHR2)試劑盒Human AAGAB (Alpha- and gamma-adaptin-binding protein p34) ELISA KIT單跨膜蛋白FOXRED1抗體
豬顆粒體蛋白(GRN)試劑盒Human AGPS (Alkyldihydroxyacetonephosphate synthase, peroxisomal) ELISA KITFOXRED2蛋白抗體
豬GATA結合蛋白5(GATA5)試劑盒Human ADRB2 (Beta-2 adrenergic receptor) ELISA KIT巖藻糖1磷鳥苷酰轉移抗體
豬酪羥化(TH)試劑盒 Human ALMS1 (Alstrom syndrome protein 1) ELISA KIT外基質蛋白FREM1抗體
豬血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒 Human ADRA1D (Alpha-1D adrenergic receptor) ELISA KIT原癌基因FRAT1抗體
豬胚外胚層發育蛋白(EED)試劑盒Human AMER1 (APC membrane recruitment protein 1) ELISA KIT叉頭蛋白D1抗體
豬著絲粒蛋白F(CENPF)試劑盒 Human AMBN (Ameloblastin) ELISA KIT11重鏈抗體
MDHAR單脫氫抗壞血酸還原酶微量法乙型肝炎e抗原Anti-LPAR5 Antibody小鼠肝癌衍生生長因子(HDGF)elisa定量檢測試劑盒
乙型肝炎e抗體Anti-LRG1 Antibody小鼠胰島樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)elisa定量檢測試劑盒
乙型肝炎核心抗體Anti-LPCAT2 Antibody小鼠巨噬移動抑制因子(MIF)elisa定量檢測試劑盒
乙型肝炎核心抗體 IgMAnti-LRP10 Antibody小鼠神經絲蛋白(NF)elisa定量檢測試劑盒
促黃體生成Anti-LRP10 Antibody小鼠基質金屬蛋白原-9(Pro-MMP-9)elisa定量檢測試劑盒
促卵泡生成Anti-LRP3 Antibody小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANκL)elisa定量檢測試劑盒
催乳Anti-LRP11 Antibody小鼠白介12(IL-12)elisa定量檢測試劑盒
孕酮Anti-LRRC41 Antibody小鼠白介13(IL-13)elisa定量檢測試劑盒