氯丙嗪檢測試劑盒1. 測定原理氯丙嗪檢測試劑盒是利用免疫學(xué)直接競爭法的原理，固相載體微孔板上包被有氯丙嗪蛋白偶聯(lián)物，加入待測氯丙嗪標準品或樣品溶液及氯丙嗪的抗體，包被在微孔板上的氯丙嗪蛋白偶聯(lián)物和標準品或樣品中的氯丙嗪競爭性地與抗體結(jié)合，形成抗原抗體復(fù)合物；洗滌后再加入二抗，洗滌后加入顯色劑，將無色的顯色劑轉(zhuǎn)化為藍色的產(chǎn)物；加入反應(yīng)終止液后使顏色由藍色變?yōu)辄S色；在450nm波長進行檢測，樣品中的氯丙嗪濃度與吸收光強度成反比。
 
2. 氯丙嗪檢測試劑盒試劑盒組成
（1）96孔酶標板：     1塊 96 T/8孔
（2）標準品：      0 ppb、0.1 ppb、0.3 ppb、0.9 ppb、2.7 ppb、8.1ppb（1mL/瓶）
（3）抗體工作液：      1瓶（7mL）
（3） 酶標記物：       1瓶（12mL）
（4）底物緩沖液：      1瓶（7mL）
（5）底物液：          1瓶（7mL）
（6）終止液：          1瓶（7mL）
（7）20倍濃縮洗滌液：  1瓶（50mL）， 加蒸餾水稀釋到1000 mL 
（8）復(fù)溶液（濃縮）：   1瓶（15ml），加蒸餾水稀釋至300ml
（9）使用說明書        1 份
（10）封板膜：          2張
（11）封口袋：         1 個
 
3. 氯丙嗪檢測試劑盒注意事項 
（1）終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。
（2）不要使用過了有效日期的氯丙嗪檢測試劑盒，不同批次、不同試劑盒之間的試劑等內(nèi)容不可混用，以免降低靈敏度。
（3）0標準品的A450nm<0.6時，表示試劑可能變質(zhì)，請勿使用。
（4）顯色劑變藍，表明已變質(zhì)，請勿使用。
 
4. 儲存條件
（1） 2-8℃保存，切勿冷凍。
（2）將不用的酶標板放進帶干燥劑的封口袋中密封保存。
（3） 酶標記物和顯色液對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
 
5. 氯丙嗪檢測試劑盒樣品處理
（1） 尿樣
取新鮮干凈的尿樣50 μL進行分析。
 （2）組織、肌肉樣品 （稀釋倍數(shù)為1）
a．取1g±0.05 g組織，加入6 mL乙腈，振蕩10 min,室溫4000 r/min以上離心10 min；
b．取全部上清置于離心管中；在殘渣中再加入4ml乙腈，振蕩10 min，室溫4000 r/min以上離心10min。
c．混合兩次上清液，振蕩1min，于50 ℃下氮氣或室溫下吹風機吹干；
d．加入1 mL配好的復(fù)溶液，取50 μL進行分析。
 
6. 氯丙嗪檢測試劑盒免疫分析時試劑的準備
（1） 注意事項
a) 使用之前將所有試劑回升至室溫。 
b) 使用之后立即將所有試劑放回2-8℃。 
c) 在使用中不要讓微孔干燥。 
d) 在EIA分析中的重復(fù)性，很大程度上取決于洗板的*性，仔細按照推薦的洗板順序操作是EIA測定程序中的要點。 
e) 在所有恒溫孵育過程中，避免光線照射，用蓋板膜蓋住微孔板。
（2） 濃縮洗滌液使用前應(yīng)根據(jù)所需量進行20倍稀釋，即按1 mL濃縮洗滌液加入19 mL蒸餾水的比例進行稀釋。
（3） 復(fù)溶液為濃縮溶液，使用前應(yīng)根據(jù)需要量進行20倍稀釋，即按1 mL濃縮洗滌液加入19 mL蒸餾水的比例進行稀釋。
 
7. 氯丙嗪檢測試劑盒測定程序
（1） 將標準品、樣品所需微孔板（均需2個平行試驗）放在反應(yīng)架上。
（2） 加入50 μL樣品或標準品到微孔板中，再加入50 μL抗體工作液到微孔板中，充分振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后，37℃下反應(yīng)30 min 。
（3） 棄去孔中液體，每孔注滿稀釋好的濃縮洗液，輕輕振蕩，棄去孔中液體，并在吸水紙上拍干，重復(fù)6次。
（4）加入100 μL酶標記物到微孔板中，用蓋板膜蓋板后，37℃下反應(yīng)20 min 。
（5）棄去孔中液體，每孔注滿稀釋好的濃縮洗液，輕輕振蕩，棄去孔中液體，并在吸水紙上拍干，重復(fù)6次。
（6）加入50 μL底物液緩沖液，再加入50 μL底物液，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后在37℃下暗處孵育10min。
（7）加入50 μL終止液到微孔板中，混合好在450 nm處測量吸光度值，必須在加入終止液后15分鐘內(nèi)讀取光度值。
 
8. 氯丙嗪檢測試劑盒技術(shù)指標
靈敏度：0.1ppb
半抑制濃度（IC50）：≤0.7 ppb
標準曲線范圍：0.1-8.1ppb  
精確度：板內(nèi)變異誤差小于5%，板間變異誤差小于10%
準確性（回收率）：尿液、組織、肌肉：100±20%

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