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  • CSL半胱氨酰亞砜裂解酶可見分光光度法

CSL半胱氨酰亞砜裂解酶可見分光光度法

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  • 型號
  • 品牌其他品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時間2022-04-11
  • 廠商性質經銷商
  • 入駐年限8
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  • 產品數量9987
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貨號FS-01S63415
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CSL半胱氨酰亞砜裂解酶可見分光光度法 產品詳情

產品屬性:

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

CSL半胱氨酰亞砜裂解酶可見分光光度法

50管/24樣

可見分光光度法

FS-01S63415

商品介紹:

測定意義

半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)廣泛存在于百合科蔥屬(如大蒜和洋蔥),十字花科蕓薹屬

(如卷心菜,菜花,西蘭花),以及豆科中的合金歡屬中,并通常被稱為蒜氨酸酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰轉肽酶和半胱氨亞砜裂解酶的作用下轉化成香菇精,以及產生丙酮酸、乙醛、甲醛和NH3。CSL是內源性甲醛生成的關鍵酶之一,測定CSL活性對于研究食品安全具有重要意義。

測定原理

CSL催化S-甲基-L-半胱氨亞砜反應產生丙酮酸,與2,4-二硝基肼反應,在堿性條件下顯棕紅色,在510nm下有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器

天平、研缽、離心機、分光光度計、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、蒸餾水。

樣本前處理步驟:
樣本處理前須知

處理任何樣本時,都必須注意:

(1) 實驗中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時要更換吸頭(2)實驗前須檢查各種實驗器具是否干凈,必要時對實驗器具進 行清潔,避免污染干擾實驗結果。

(a)組織樣品處理方法:

1、 稱取5±0.05g組織樣品于50ml離心管中,先加入3ml已稀釋好的樣品提取液震蕩2min;再加入10ml乙腈,充分震蕩5min,

2、 加入2g中性氧化鋁;震蕩2min ,室溫4000r/min以上,離心10min;;

3、 取6ml上清液于干凈離心管中,加入5ml二氯甲烷震蕩3min ,室溫4000r/min以上,離心10min;;

4、 取下層清澈液體于玻璃管中,加入20ul氧化劑混勻,在56℃條件下氮氣或空氣流吹至*干燥;

5、 加入1ml復溶液,充分溶解干燥殘留物。

6、 取100ul 上清液與100ul 已稀釋好的復溶液充分混合30s,

7、 取50ul進行分析。

樣本稀釋倍數: 1倍

(b)水樣品處理方法:

1、取50ul 上清液與450ul 已稀釋好的復溶液充分混合30s,

2、取50ul進行分析。

樣本稀釋倍數:10倍

 

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實驗通用規則:
1、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。

2、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。

3、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。

4、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

5、實驗時,要使底物避光保存。

6、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

7、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定。

8、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。

10、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。


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