紅色標(biāo)本保色液Ⅲ正在熱銷的產(chǎn)品：GSK-3 Beta(CT)/FITC 熒光標(biāo)記葡萄糖合成激-3β抗體IgG三酯
p-GSK-3 Beta/FITC(phospho-Ser9) 熒光標(biāo)記化葡萄糖合成激-3β抗體IgG三苯酯 CP
phospho-GSK-3 Beta(Thr390) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化葡萄糖合成激3β抗體IgG2-氨-5- 97%
Phospho-GSK
產(chǎn)品介紹:
注意事項： 由硼酸、亞硫酸等組成。在制作保色浸制標(biāo)本后，瓶口要用石蠟或者凡士林密封嚴(yán)實，并避免陽光直射。 儲存條件：室溫，12個月 |
中文名稱：紅色標(biāo)本保色液Ⅲ
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：500ml
貨號：FS-X10210
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
啤酒神金黃桿菌葡萄糖合成2抗體Human THAP2 大鼠磷蛋白關(guān)聯(lián)鞘糖脂微區(qū)1(PAG1)免疫試劑盒
盾殼霉谷草轉(zhuǎn)2抗體Human THG1L 大鼠淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌葡萄糖-6磷脫氫抗體Human THEM4 大鼠淋巴功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)免疫試劑盒
黑曲霉葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白5抗體Human THNSL2 大鼠亮酰基肽(LAP)免疫試劑盒
白僵菌葡萄糖合成1抗體Human THOC1 大鼠粒巨噬集落激因子(GM-CSF)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌G蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體Human TGIF2LX 大鼠粒集落激因子(G-CSF)免疫試劑盒
木賊鐮孢甘油激3抗體Human THOC2 大鼠類固5α還原1(SRD5A1)免疫試劑盒
唾液乳桿菌高爾基體磷蛋白3樣蛋白抗體Human TGM4 大鼠類風(fēng)濕因子(RF)免疫試劑盒
泡囊短波單胞菌磷化谷受體1抗體Human TFDP2 大鼠酪羥化(TH)免疫試劑盒
康氏木霉G蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human TFDP1 大鼠酪蛋白激JAK3(Jak3)免疫試劑盒
pDC316磷化G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1抗體Human SNX9(Sorting nexin-9) 大鼠克拉拉蛋白(CC16)免疫試劑盒
云芝磷化G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1Human TFE3 大鼠可溶性腫瘤壞死因子樣凋亡微弱誘導(dǎo)劑(sTWEAK)免疫試劑盒
灰樹花孔菌葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白抗體Human TFEB 大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)免疫試劑盒
土壤薄層菌GTP結(jié)合蛋白10抗體Human TFEC 大鼠可溶性血小板內(nèi)皮粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)免疫試劑盒
總狀毛霉磷化Ras GTP活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體Human TFIP11 大鼠可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)免疫試劑盒
Cerrena unicolorRas GTP活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體Human TFPT 大鼠可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體(sEPCR)免疫試劑盒
鮭色諾卡氏菌Nocardia│salmonicolor 質(zhì)量規(guī)格：for HPLC,≥99.0%(T)異蓮心堿
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格：for HPLC,≥99.0%綿馬ABA
秦氏蜜環(huán)菌Armillaria│qinii H.C. Wang & J. Zhao 質(zhì)量規(guī)格：離子對色譜級大黃-8-β-D-吡喃葡萄糖
紅色標(biāo)本保色液Ⅲ鱈鹽球 二苯基硅烷5α還原
土壤薄層 四溴雙S腎炎因子
茄鐮孢 DL-間酪頂體
蠟狀芽孢桿蕈狀變種 對溴芐DNA甲基化轉(zhuǎn)移
花臉香蘑 聚乙二二縮水甘油溶血
綠木霉 3-溴-4-甲氧基20-羥化二十碳四烯
寬鱗大孔 3,4-二羥基S轉(zhuǎn)移Mu5
硫黃色節(jié)桿 丁香乙酯過氧化1
釀酒酵母 2,4-二氟肉桂過氧化4
鉤狀木霉 5--2-氟過氧化5
食砜節(jié)桿 三溴化吡啶維生D結(jié)合蛋白
多孔木霉 2-溴-4-硝苯抗透明帶結(jié)合蛋白3抗體
側(cè)孢短小芽胞桿 2,4-二氟苯血清白蛋白
乳乳球乳亞種 1-芐基-3-甲氧羰基-4-酮鹽鹽環(huán)氧合2
香鬼筆 3-溴-4-L-精
