20S蛋白酶體抑制劑(Epoxomicin)正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：NIS(Na+/I-symporter;NIS) 鈉轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白（多肽抗原）明膠 CP
NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 核因子或稱(chēng)k因結(jié)合核因子(多肽抗原)明膠 藥用級(jí)，膠強(qiáng)度 ~240 g Bloom
NR2A (Glutamate receptor2A) 谷氨受體（N端抗原）明膠 照相級(jí)，膠強(qiáng)度 ~
產(chǎn)品介紹:
Epoxomicin(BU-4061T)是從放線(xiàn)菌中分離出的抗腫瘤化合物，是20S蛋白酶體的選擇不可逆抑制劑。 注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！ 號(hào)：134381-21-8 別名：BU-4061T 純度：99.89% 分子量：554.72 儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
中文名稱(chēng)：20S蛋白酶體抑制劑(Epoxomicin)
英文名稱(chēng)：Epoxomicin
產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|100ug|1mg|5mg|10mg|20mg
貨號(hào)：FS-X10618
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
冬蟲(chóng)夏草PE-Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgMAnti-SLC18A1 Antibody核基質(zhì)蛋白4(NMP4)
耐熱鹽土生古菌PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠IgMAnti-SLC16A4 Antibody核黃轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(RFT2)
明尼蘇達(dá)被毛孢Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗小鼠IgMAnti-SLC18A3 Antibody核還原M1(RRM1)
枯草芽孢桿菌堿性磷（AP）標(biāo)記的兔抗小鼠IgMAnti-SLC19A1 Antibody核磷化(NP)
大腸埃希氏菌堿性磷（AP）標(biāo)記的羊抗小鼠IgMAnti-SLC1A1 Antibody和肽(CPP)
球孢白僵菌辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A1 Antibody合子阻滯基因1(ZAR1)
臺(tái)中金黃桿菌膠體金標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A2 Antibody汗αL(IDUα)
豌豆根瘤菌（都不提供）PE標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A1 Antibody含硬化蛋白域蛋白1(SOSTDC1)
圓褐固氮菌PE-CY5標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A3 Antibody含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)
大腸埃希氏桿菌PE-Cy7標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A3 Antibody含血管性血友病因子A域蛋白2(vWA2)
噬組節(jié)桿菌生物標(biāo)記的兔抗豬IgGAnti-SLC1A3 Antibody含血管性血友病因子A域蛋白1(vWA1)
變幻青霉生物標(biāo)記的兔抗大鼠IgGAnti-SLC1A4 Antibody含溴區(qū)PHD指蛋白1(BRPF1)
鶴羽田戴爾福特菌辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的小鼠抗兔IgMAnti-SLC1A3 Antibody含鋅飄帶域蛋白1(ZNRD1)
戊糖片球菌PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgGAnti-SLC1A6 Antibody含纈酪肽蛋白(VCP)
孟氏假單胞菌Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗兔IgGAnti-SLC22A1 Antibody含鈀蛋白(PALLD)
淺絳紅鏈霉菌Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗兔IgGAnti-SLC22A3 Antibody含卵巢癌免疫反應(yīng)抗原域蛋白2(OCIAD2)
神經(jīng)束蛋白186抗體純黃絲衣霉大鼠胃粘膜上皮細(xì)胞提取物
膜相關(guān)磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體紅冬孢酵母大鼠淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物
活化T細(xì)胞核因子5蛋白抗體大核青霉大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物
神經(jīng)激肽B抗體橘灰青霉大鼠淋巴內(nèi)皮細(xì)胞提取物
20S蛋白酶體抑制劑(Epoxomicin)木層孔 氧化釕腦脊髓炎
木賊鐮孢 三氧化二鎳乙型肝炎病表面抗原
核盤(pán) 氮化硅流感病
糞肥纖維單胞 氮化硅睪酮
三葉草葉桿 氮化鉭雌
多主葡萄殼 鈦鎂腎上腺
庫(kù)爾薩諾夫鏈霉 氧化镥去甲腎上腺
胃竇乳桿 鈮鋰孕酮
根霉 二氧化銥血清促性腺
孔雀石（綠）鏈霉 硫化銦(III)抗HCG抗體
亞膜威克漢姆酵母 硅鎢，二十六水雄性
釘斑鏈霉 氧化鎵生長(zhǎng)
釀酒酵母 碲化鎵(II)糖皮質(zhì)
薄層桿 納鍶鐵氧體鹽皮質(zhì)
大腸埃希氏 六氟鋯甘膽抗體
