產品介紹:
用途: 軟骨染色,主要顯示透明軟骨 注意事項: 有碳酸鉀、美藍等組成。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
中文名稱:Unna堿性美藍染色液
英文名稱:
產品規格:100ml
貨號:FS-X9941
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
枯草芽孢桿菌鋅指蛋白851抗體Human FGFBP2 豚鼠膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)免疫試劑盒
草分枝桿菌嗜乳脂蛋白2亞型A1抗體Human FKBP10 豚鼠脂(CHE)免疫試劑盒
線殼囊孢(座線孢)磷化c-fos抗體Human FKBP1A 豚鼠單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫試劑盒
百脈根中間根瘤菌磷化c-fos抗體Human FKBP14 豚鼠單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒
煙色齒耳磷化原癌基因c-Jun抗體Human FGFR1OP 豚鼠單氧化(MAO)免疫試劑盒
櫟金錢菌磷化原癌基因c-kit抗體Human FGFBP3 豚鼠催產(OT)免疫試劑盒
反硝化鹽單胞菌1號染色體開放閱讀框148抗體Human FNDC3A 豚鼠促腎上腺皮質激(ACTH)免疫試劑盒
薄層菌屬性T抗原-4抗體Human FKBP1B 豚鼠促卵泡(FSH)免疫試劑盒
細鏈格孢鈣調調節蛋白相關蛋白抗體Human FN3KRP 豚鼠雌激(estrogen)免疫試劑盒
暗擬莖點霉(可訂購)緊密連接蛋白1抗體Human FNTA 豚鼠腸脂肪結合蛋白(iFABP)免疫試劑盒
產卟啉桿菌1號染色體開放閱讀框149抗體Human FNIP1(Folliculin-interacting protein 1) 豚鼠表皮生長因子(EGF)免疫試劑盒
產黑鏈霉菌磷化原癌基因c-kit抗體Human FLCN 豚鼠白三烯D4(LTD4)免疫試劑盒
針葉樹散斑殼磷化原癌基因c-kit抗體Human FLJ25006 豚鼠白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒
球孢白僵菌磷化淋巴衍生C-型凝集抗體Human FLJ10357 豚鼠白介8(IL-8)免疫試劑盒
葡萄座腔菌2號染色體開放閱讀框39抗體Human FLI1 豚鼠白介6(IL-6)免疫試劑盒
稻生黃單胞菌2號染色體開放閱讀框49抗體Human FMN1 豚鼠白介5(IL-5)免疫試劑盒
根瘤菌Rhizobium│sp. 質量規格:>98%,BRα1微球蛋白/bikunin前體試劑盒5-羥基馬鞭草
沙漠奇異球菌Deinococcus│deserti 質量規格:>99%,BRα1性糖蛋白試劑盒去氧基醉椒
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質量規格:>98%,BRα1抗胰糜蛋白試劑盒去氫駱駝蓬堿
Unna堿性美藍染色液朱黃籃狀 FMOC-D-1,2,3,4-四氫-Β-咔啉-3-羧β2巨球蛋白
Paenibacillus durus 2,3,7,8,12,13,17,18-八乙基-21H,23H-卟吩α-烯化
解脂假絲酵母 3-氨基-2,2-二甲基-1-(草鹽形式)α-烯化
加德納 8-苯基辛胸腺表達趨化因子
長蠕孢 N-(4-溴苯基)硫脲再生胰島衍生蛋白4
褐囊蜜環 N-3-異惡唑叔丁酯p物質前提
野土地桿 5-溴-2-呋喃甲酰肼EB病包膜糖蛋白gp350抗體
釀酒酵母 4-硝基馬尿MG29抗體
不產色鏈霉不產色亞種 4-氨基鄰甲組釋放因子
釀酒酵母 2-溴-1,3-二-5-氟苯磷化肝生長因子受體
噬果膠黃桿 3--1,2,3-三羧map2k5
地衣芽孢桿 3-氧雜環丁烷支原體IgG抗體
康寧木霉 3-二氟甲氧基衣原體抗體IgG
相思根瘤 4-甲氧基-2-乙肺炎支原體IgM抗體
膨端青霉 2,4-二羥基-3-硝基吡啶肌抗體