產品名稱 | MDBK牛腎細胞 | 貨號 | A01X1178 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | MDBK:MDBK |
分類 | 牛系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹：
別稱 | MDBK (NBL-1) |
種屬 | 牛 |
年齡（性別） | 雄性，成年 |
組織來源 | 腎；正常細胞 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
詳情簡介 | MDBK(NBL-1)細胞是由S·H·Madin和N·B·Darby在1957年2月18日從一只表觀正常的成年牛腎臟建立的。1973年，這株MDBK(NBL-1)細胞被牛病毒性痢疾病毒(BVDV)感染；1982年，發(fā)現(xiàn)了一株未被BVDV感染的MDBK(NBL-1)細胞株，此細胞最初來自ATCC1967年7月第96代的凍存管。MDBK(NBL-1)細胞的后代經NVSL檢測，未發(fā)現(xiàn)被任何病毒污染的證據(jù)。1982年8月，R·A·Van Deusen將MDBK(NBL-1)提供給ATCC時，已傳代至第110代；M??? |
生物安全等級 | 2 |
生長培養(yǎng)基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~35小時 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣，95%；CO2，5% |
溫度 | 37℃ |
公司所有產品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項：
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態(tài)好，細胞數(shù)量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮，需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產品：
Cy5標記的血管內皮細胞生長因子受體3抗體 英文名；VEGFR3, Cy5 conjugated維甲酸相關孤兒受體γt抗體 英文名；ROR gamma T
Cy7標記的腱調蛋白/軟骨調節(jié)素樣1蛋白抗體 英文名；TNMD, Cy7 conjugated維甲酸相關孤兒受體γ抗體 英文名；RORC
Cyclin A1相互作用蛋白抗體 英文名；PROCA1維甲酸誘導蛋白14抗體 英文名；RAI14
CYLC2蛋白抗體 英文名；CYLC2維甲酸誘導蛋白16抗體 英文名；RAI16
CYP1A2單克隆抗體 英文名；CYP1A2維甲酸誘導蛋白17抗體 英文名；Retinoic acid induced 17
CYP1A2抗體 英文名；CYP1A2維甲酸誘導蛋白1抗體 英文名；RAI1
CYP27B1單克隆抗體 英文名；CYP27B1維甲酸誘導蛋白3抗體 英文名；RAI3
C端結合蛋白1抗體 英文名；CTBP1維甲酸誘導蛋白6抗體 英文名；STRA6
C-反應蛋白單克隆抗體 英文名；CRP(C11F2)維甲酸誘導神經母細胞瘤蛋白1抗體 英文名；NAV2
C-反應蛋白抗體 英文名；CRP維甲酸早期轉錄1G蛋白抗體 英文名；RAET1G
C末端結合蛋白2抗體 英文名；CTBP2尾側型同源轉錄因子1抗體 英文名；CDX1
C-肽抗體 英文名；C Peptide尾側型同源轉錄因子2/3抗體 英文名；CDX2+3
C型鈉利尿多肽抗體 英文名；NPPC/Atrial natriuretic peptide尾加壓素2相關肽抗體 英文名；UTS2D
MDBK牛腎細胞C型凝集素4家族E抗體 英文名；CLEC 4E尾型同源盒轉錄因子2單克隆抗體 英文名；CDX2
C型凝集素結構域家族12成員A抗體 英文名；CLEC12A尾型同源盒轉錄因子2抗體 英文名；CDX2
C型凝集素結構域家族16成員A抗體 英文名；CLEC16A尾型同源盒轉錄因子2重組兔單克隆抗體 英文名；CDX2
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng)：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉染后不利篩選細胞。
(2) 轉染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)
A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質粒DNA。
B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質體。
分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉染準備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉染：把A/B復合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。
