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| 產品名稱 | EHA105 感受態細胞 100ul*50 |
| 包裝 | 100ul*50 |
| 分類 | 根癌農桿菌感受態細胞 |
培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。
5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養至少15小時。
MIF 人巨噬細胞移動抑制因子 規格： 48T/96T
MIP-5 人巨噬細胞炎性蛋白5 規格： 48T/96T
MIP-3β/ELC 人巨噬細胞炎性蛋白3β 規格： 48T/96T
MIP-3α/CCL20 人巨噬細胞炎性蛋白3α 規格： 48T/96T
MIP-2 人巨噬細胞炎性蛋白2 規格： 48T/96T
MIP-1β/CCL4 人巨噬細胞炎性蛋白1β 規格： 48T/96T
MIP-1α/CCL3 人巨噬細胞炎性蛋白1α 規格： 48T/96T
AmAC-1 人巨噬細胞替代激活相關化學因子1 規格： 48T/96T
MCF 人巨噬細胞趨化因子 規格： 48T/96T
MDC/CCL22 人巨噬細胞來源的趨化因子 規格： 48T/96T
M-CSFR 人巨噬細胞集落刺激因子受體 規格： 48T/96T
M-CSF 人巨噬細胞集落刺激因子 規格： 48T/96T
MAF 人巨噬細胞活化因子 規格： 48T/96T
MSP 人巨噬細胞刺激蛋白 規格： 48T/96T
Arg 人*酶 規格： 48T/96T
AVP 人*加壓素 規格： 48T/96T
MT 人金屬硫蛋白 規格： 48T/96T
SE 人金葡菌腸毒素 規格： 48T/96
shēng huà shì j
shēng huà shì jì 草酸鍶 容量： RT 25克
shēng huà shì jì 草酸氫鉀 容量： 250克
shēng huà shì jì 草酸鎳 容量： 30毫升
shēng huà shì jì 草酸鈉 容量： RT 1克
shēng huà shì jì 草酸鋰 容量： 2～8℃，避光 250毫克
shēng huà shì jì 草酸鉀 容量： 500克
shēng huà shì jì 草酸鈷 容量： 1公斤
shēng huà shì jì 草酸高鐵銨 容量： 2～8℃ 1克
shēng huà shì jì 草酸鈣 容量： RT 100毫克
shēng huà shì jì 草酸二乙酯 容量： 500克
shēng huà shì jì 草酸銨 容量： 25克
shēng huà shì jì 草酸 容量： 25克
shēng huà shì jì 藏紅T 容量： 5克
shēng huà shì jì 燦爛甲酚藍 容量： 2～8°C 25克
shēng huà shì jì 蠶蛹蛋白胨 容量： 保存：-20℃ 100毫克
shēng huà shì jì 布氏肉湯 容量： 25毫升
shēng huà shì jì 布氏瓊脂 容量： 2～8℃ 25毫升
shēng huà shì jì 布氏菌選擇性培養基 容量： 50張/盒
shēng huà shì jì 布魯諾廣譜高效殺菌劑 容量： 5克
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注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態細胞為例。
2．待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100 μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養45分鐘使菌體復蘇
5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時。
